血管破坏剂A64对裸鼠Huh7肝癌移植瘤早期改变的超声造影评价

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目的:通过超声造影评价血管破坏剂A64对裸鼠Huh7肝癌移植瘤作用的早期改变。材料与方法:构建裸鼠Huh7肝癌移植瘤模型,将荷瘤裸鼠分为血管破坏剂(Vascular Disrupting Agent,VDA)A64实验治疗组和生理盐水对照组。分别于基态(注药前)及注药后1小时、2小时、4小时及24小时进行常规彩色超声检查及超声造影检查,彩色超声检查记录实验组与对照组肿块的大小及血流信号,超声造影检查脱机分析得到达峰时间(Time to Peak,TTP)、峰值强度(peak intensity,PI)、上升支斜率(Wash in Rate,WiR)三个超声造影参数。对实验组与对照组移植瘤不同时间点进行平行病理检查,行常规HE染色及免疫组化CD31染色检测,观察肿瘤内细胞密度、坏死情况及肿瘤血管形态、数量等定性指标。结果:1.选取造模成功的Huh7肝癌移植瘤裸鼠42只,A64组(n=8)与对照组(n=7)在基态及注药后1小时、2小时、4小时及24小时,肿瘤大小及血流情况(未探及明显血流信号)基本无变化。2.超声造影:A64组与对照组进行重复测量设计的方差分析,A64组各时间点测量TTP及PI呈减低趋势,WiR呈增大趋势。TTP、PI、WiR的时间效应均具有统计学意义,TTP(F=5.295,P=0.047),PI(F=6.303,P=0.029),WiR(F=15.643,P=0.002);A64组内之间的比较:(1)TTP,基态与1h、2h、4h、24h差异均有统计学意义(P分别为0.005、0.000、0.000、0.000)。1h与24h之间差异具有统计学意义(P为0.006)。(2)峰值强度比较,基态与1h及2h之间的差异没有统计学意义(P分别为0.133、0.202),基态与4h及24h之间差异具有统计学意义(P分别为0.047、0.004)。3.病理结果:27只裸鼠分为基态(n=3),A64实验治疗组(n=12)及对照组(n=12)行H.E染色及CD31标记检查,A64实验治疗组与对照组分别于1小时、2小时、4小时及24小时各处死3只进行H.E染色及CD31标记,H.E染色发现A64治疗后2h开始出现坏死,至4h及24h时,坏死范围进一步扩大。CD31标记可见VDA治疗后管腔狭窄,管壁完整性被破坏,24h肿瘤周边新生小血管明显增多。结论:1.常规超声对A64早期治疗Huh7肝癌裸鼠移植瘤疗效评估作用不大,超声造影检查的TTP、PI及WiR能够反映治疗前后肿瘤灌注速度、容量指标的变化;2.A64能够早期作用于Huh7肝癌裸鼠移植瘤的血管内皮细胞,引起肿瘤组织缺血、坏死及出血改变;治疗后早期CD31明显减低,肿瘤坏死后反馈性CD31升高,血管通透性进一步升高;超声造影参数的变化与病理关系密切。
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