论文部分内容阅读
背景及目的：临床研究表明宫颈癌同步放化疗期间3度以上骨髓抑制发生率可达30-50%。其严重骨髓抑制的发生除与盆腔骨髓放疗剂量体积及化疗药物的使用相关外是否与宫颈癌患者根治切除术后卵巢摘除或盆腔放疗卵巢损伤后雌激素缺乏相关呢?越来越多研究显示,雌激素和造血作用之间关系密切,雌激素能增强骨髓造血功能,可以促进造血干细胞的增殖及自我更新。当卵巢摘除雌激素缺乏时可以出现造血组织的减少,最终出现造血功能衰竭。另外,国内外有大量研究显示雌激素对放射性造血损伤有防护作用,能够增强骨髓细胞放射抵抗性,能促进放疗后骨髓抑制的恢复。因此,我们推测由于手术切除卵巢或放疗所致卵巢功能受损雌激素缺乏后放疗可能会加重骨髓损伤。为了进一步验证此假设,我们提出本课题研究。我们通过对大鼠进行双侧卵巢摘除术建立雌激素缺乏模型,了解雌激素缺乏对大鼠骨髓造血功能及放疗所致骨髓抑制的影响。方法：在本研究中,购买健康雌性S-D大鼠24只,随机分假手术组(Sham)、卵巢摘除组(OVX)、假手术+放疗组(Sham+IR)、卵巢摘除+放疗组(OVX+IR),每组6只。通过戊巴比妥麻醉后进行双侧卵巢切除术及假手术,术后4周通过尾部取血采用电化学发光法检测大鼠雌激素水平。随后将放疗组大鼠进行全身6Gy放疗构建骨髓损伤模型。放疗后7天采用断颈处死大鼠,收集外周血进行血常规及雌激素检查,通过对股骨干骺端H-E染色了解骨髓造血组织改变；从股骨和胫骨中收集分离骨髓单核细胞,通过流式分析CD90+/CD45RC造血干细胞(HSC)数量,通过粒细胞巨噬细胞集落形成能力(CFU-GM)检查骨髓细胞增殖分化能力。结果：术后4周检测大鼠雌激素水平发现0VX组(17.05±2.98 pg/ml)较Sham组(53.40±7.02 pg/ml)明显下降(P<0.05),Sham+IR组放疗后雌激素水平与OVX+放疗组比较(40.72±5.14 pg/ml VS 18.19±3.95 pg/ml)仍有统计学差异(P<0.05),表明通过卵巢切除术成功建立雌激素缺乏大鼠模型。OVX+IR组外周血的白细胞、血小板、骨髓造血组织比例、CD90+/CD45RC- HSC及CFU-GM数量(分别为2.43±0.51×109／L,614.50±113.79×109/L,17.33±4.46%,1.04±0.22%,115.5±21.2/1.5×104个细胞),与Sham+IR组(3.32±0.45×109／L,752.83±96.98×109／L,24.5±4.04%,1.53±0.21%,157.67±24.34/1.5×104个细胞)(P<0.05)相比均有下降差异有统计学意义(P<0.05)。但OVX组(7.10±1.08×109／L,1172.10±110.62×109/L,55.53±6.47%,2.34±0.21%,323.67±19.13/1.5×10‘个细胞)与Sham组(6.76±1.14×109／L,1088.70±121.56×109／L,59.17±4.12%,2.51±0.19%,309.17±27.75/1.5×104个细胞)比较没有明显差异(P>0.05)。结论：大鼠双侧卵巢摘除后4周,大鼠雌激素水平明显降低,能成功建立雌激素缺乏模型。雌激素缺乏5周大鼠骨髓造血功能未见明显改变。维持一定水平雌激素能够不同程度增加骨髓HSC数量、HSC CFU-GM形成能力、骨髓造血组织容积及外周血中WBC、PLT数量等,从整体上改善放疗所致骨髓抑制。