【摘 要】
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有性生殖生物在受精时卵胞质内钙离子浓度的瞬时升高为卵激活和胚胎发育的启始所必需。不同于其他脊椎动物的单次钙升高受精钙信号模式,哺乳动物卵子受精时普遍发生长达数小
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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有性生殖生物在受精时卵胞质内钙离子浓度的瞬时升高为卵激活和胚胎发育的启始所必需。不同于其他脊椎动物的单次钙升高受精钙信号模式,哺乳动物卵子受精时普遍发生长达数小时的钙振荡。大量研究表明:受精钙振荡调控着卵激活多个事件的启始与完成,这是哺乳动物受精钙信号的短期效应。然而,关于受精钙信号是否具有长期效应,是否会影响到后续的胚胎发育,目前还没有明确的答案。本研究首先通过移植振荡性钙信号和单次钙升高两种不同钙信号模式激活后的孤雌发育囊胚,结合早期植入点显示技术和大样本的统计分析,识别出胚胎植入是受卵激活钙信号调节的关键发育事件。通过RT q-PCR方法,我们发现Lif和Vegf这两个胚胎植入相关基因的表达在不同钙信号模式激活后的孤雌发育囊胚之间存在显著性差异。此外,我们还发现卵激活模式可影响10.5天胚胎的项臀径,通过高通量的mRNA Microarray检测,发现不同钙信号模式激活所获得的E10.5孤雌发育胚胎之间,部分基因存在着表达差异,通过RT q-PCR方法验证了Plagll、Peg3两个已知会影响胚胎大小的印记基因只有在振荡性钙信号激活后才在E10.5孤雌发育胚胎中表达的现象。进一步的研究发现卵激活钙信号模式可影响Plagll基因DMR区域DNA甲基化水平,并且这种DNA甲基化模式在1细胞期已经建立,提示主动去甲基化机制可能参与了这种DNA甲基化水平的改变。我们的结果表明:卵激活钙信号对哺乳动物胚胎发育具有长期效应,可影响胚胎植入效率、胚胎的大小以及印记基因的DNA甲基化水平与表达。
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