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真核细胞中,在基因的表达转录后调控的过程中涉及到多种蛋白质的参与,其中最重要的是RNA结合蛋白。已知的RaNA结合蛋白中,研究的较多的是具有RNA识别基序的结构域(RNA recognition motif, RRM)、富含亚精氨的结构域(the arginine motif, ARM)和KH结构域(K homologymotif,KH)的这几类RNA结合结构域(RNA binding domain,RBD)。
RRM结构域是迄今研究得最多的一类RNA结合结构域,在真核生物基因表达调控中发挥着重要的功能。在拟南芥自主开花过程中,基因FCA编码的蛋白起着非常重要的作用,FCA蛋白具有两个RRM结构域和一个wW蛋白互作域。我们已报道克隆的水稻rFCA基因与拟南芥FCA基因同源,编码两个RRM结构域。为了研究RRM结构域的功能,将RRM1、RRM2片段分别克隆到植物表达载体pCAMIBIA 1304、pBY520,通过基因枪转化法转化籼稻9311、粳稻中花11。结果显示,RRM1、RRM2过表达转基因阳性植株表型都发生了相似的改变,与对照植株相比较,生育期延迟两周左右、转基因植株的叶片较对照植株叶片增厚、坚硬、加宽且呈深绿色;转基因水稻种子体积增大,千粒重增加;转基因植株花粉、柱头细胞较对照植株细胞增大。由此,推测水稻rFCA基因编码的两个RRM结构域,RRM1、RRM2在转基因水稻中行使相似的生物功能。参与调控转基因水稻的生育期;导致转基因水稻细胞增大;并且对水稻种子大小这一受多基因控制的重要的产量性状产生影响。
为了进一步研究RRM结构域的过表达在转基因水稻中的生物功能,选取了粒型较籼稻9311、粳稻中花11要大的水稻品种南京大粒稻作为转化受体,构建了RRM1∶GFP融合蛋白植物表达载体,通过基因枪法转化水稻品种南京大粒稻。实验初步检测到转基因南京大粒稻的种子体积增大、千粒重增加,表明RRM的过表达影响转基因水稻种子的发育进程。RRMs结构域的过表达在不同的水稻转化受体籼稻9311、粳稻中花11以及南京大粒稻中呈现出相似的表型变化,说明水稻rFCA基因编码的两个RRM结构域,RRM1、RRM2所行使的生物功能的分子机制相似,而且这种分子机制在不同的遗传背景下相对稳定。