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目的:在体外试验系统(in vitro test),研究有机氯农药-五氯酚钠(Pentachlorophenol Sodium,Na-PCP)对L-02肝细胞氧化应激和线粒体损伤,为进一步了解五氯酚钠的毒作用机制奠定实验基础。方法:以L-02肝细胞为受试细胞,通过MTT试验检测不同浓度Na-PCP对L-02肝细胞存活率的影响,选择细胞存活率为20%～90%的浓度进行后续实验。设置1个对照组和5个Na-PCP处理组,即12.812mg/L、19.218mg/L、25.624mg/L、32.030mg/L和38.436mg/L,处理时间为24h,采用化学比色法检测Na-PCP对L-02肝细胞超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响;采用荧光分光光度法检测Na-PCP对L-02肝细胞线粒体膜电位(△Ψm)和线粒体通透性转运孔(permeability transition pore,PTP)的影响。设置1个对照组和9.609mg/L、12.812mg/L、19.218mg/L三个处理组,处理时间为24h,采用Western Blotting法检测Na-PCP对肝细胞p53、细胞色素C和凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)的蛋白水平的影响。结果:1.在9.609mg/L～38.436mg/L浓度范围内,Na-PCP能明显引起L-02肝细胞存活率的降低,且存在着浓度.反应关系(r=-0.978,P＜0.01)。2.与对照组相比,12.812mg/L～38.436mg/L Na-PCP均可导致L-02肝细胞内MDA含量增加(r=0.956,P＜0.01),SOD活性下降(r=-0.900,P＜0.01),GSH含量减少(r=-0.975,P＜0.01)。3.与对照组比较,在12.812mg/L～38.436mg/L浓度范围内,随着Na-PCP染毒浓度的增加,线粒体PTP开放度明显增大(P＜0.01),且PTP开放度与浓度之间呈现明显的浓度-反应关系(r=0.997,P＜0.01)。4.与对照组比较,在12.812mg/L～38.436mg/L浓度范围内,Na-PCP导致荧光吸光度值升高,线粒体膜电位明显降低(P＜0.01),且膜电位的下降呈浓度依赖性(r=0.795,P＜0.01)。5.经9.609mg/L、12.812mg/L和19.218mg/L Na-PCP处理L-02肝细胞,各组细胞p53、细胞色素C和AIF的蛋白水平明显高于对照组细胞(P＜0.05)。结论:Na-PCP在9.609mg/L～38.436mg/L的浓度范围内,能引起L-02肝细胞存活率下降,诱发氧化损伤,表现为SOD酶活力和GSH含量下降,MDA含量上升。Na-PCP导致肝细胞线粒体膜电位崩溃和通透性转运孔开放度增大,并使得细胞色素C和AIF从线粒体释放增多。Na-PCP导致p53蛋白水平增高。