发酵法生产S-腺苷-L-蛋氨酸

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S-腺苷-L-蛋氨酸,简称SAM,是生物体内极其重要的甲基供体,参与体内40多种生化反应,在维持细胞的正常功能和存活方面发挥着重要的作用。同时在医药和保健品方面具有重要的临床应用价值。本文以诱变筛选高产SAM菌株为主,通过紫外诱变最终获得一支正突变菌株,其摇瓶产量达到1.0g/L,5L发酵罐中产量为3.0g/L,比原始菌提高了13%。同时考察了摇瓶发酵生产S-腺苷-L-蛋氨酸过程中碳源、氮源、无机盐和生长因子以及培养过程中补加L-蛋氨酸时间对S-腺苷-L-蛋氨酸的产量、含量及生物量的影响。并通过均匀实验设计对培养基配方进行优化,在30℃、180r/min的培养条件下,得到最后的培养基配方为:葡萄糖30g,酵母粉11g,(NH4)2SO412g, K2HPO4·3H2O5g, KH2PO410g, MnSO4·H2O0.09g, ZnSO4-7H2O0.14g, MgCl20.5g, CaCl20.3g, CuSO40.005g,自来水定容至1L。摇瓶中优化后的S-腺苷-L-蛋氨酸产量可以达到0.9g/L,比优化前产量提高了30%。采用优化后的培养基和培养条件在5L发酵罐中间歇培养,24h后一次性补加30g/L葡萄糖和1.0g/L-蛋氨酸,继续培养24h后产量可达2.66g/L,生物量23.4g/L。最后对间歇培养和流加培养方式时SAM的积累情况进行了比较,结果发现间歇培养过程中一次性补加L-蛋氨酸和葡萄糖溶液对菌体生长有一定的抑制作用,而在菌体达到最大浓度时开始流加前体L-蛋氨酸和葡萄糖溶液则是一种比较好的培养方式,其产量达到了5.34g/L。
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