【摘 要】
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目的:肾间质纤维化是一个独立于病因之外的进展过程,是各种慢性、进展性肾脏疾病发展至终末期肾功能衰竭的共同机制。新近研究发现,肾小管上皮细胞通过上皮细胞—肌成纤维细
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目的:肾间质纤维化是一个独立于病因之外的进展过程,是各种慢性、进展性肾脏疾病发展至终末期肾功能衰竭的共同机制。新近研究发现,肾小管上皮细胞通过上皮细胞—肌成纤维细胞转分化(EMT)机制,直接参与细胞外基质沉积,是肾间质纤维化的重要机制。转化生长因子(TGF-β)是EMT的主要诱导因子。已有研究提示吡格列酮可能对器官的纤维化具有负性调节作用。本研究探讨吡格列酮能否负性调节TGF-β诱导的肾小管上皮细胞表型重塑,以及对TGF-β下游介质结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,以阐明吡格列酮抗肾纤维化的作用及机制,为临床肾间质纤维化的治疗提供新的试验依据。 方法:将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组、TGF-β诱导组、TGF-β+DMSO组、不同剂量吡格列酮阻断组。每组设3复孔,共培养5天。应用倒置相差显微镜、HE染色、扫描电镜观察细胞形态和超微结构,以免疫组织化学、流式细胞仪和RT-PCR方法定性及定量检测肌成纤维细胞特异性标志物α-SMA;以免疫组织化学和RT-PCR的方法定性及定量检测CTGF的表达;ELISA法分析测定培养细胞上清液中Ⅲ型胶原的含量。
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