静电纺丝法制备PLLA/PCL、PLLA/PHBV组织工程支架的研究

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组织工程支架是组织工程研究的重要内容之一。目前,静电纺丝已广泛应用于组织工程支架的研究。本文采用静电纺丝技术作为制备支架材料的方法,优化纺丝工艺条件,制备出了仿细胞外基质结构的多孔网状组织工程支架材料。所制备的电纺纳米纤维支架材料具有孔隙率高、比表面积大、均一性好、长径比大等优点,能够从纳米尺度上模仿天然胞外基质,可作为细胞生长的多孔支架,促进细胞的迁移和增殖。本文选取聚乳酸、聚己内酯、聚羟基丁酸戊酸共聚酯、透明质酸为支架材料。利用静电纺丝、等离子体改性等技术制备了复合纳米支架。较为系统地测试了其用于组织工程支架的各种性能:通过扫描电镜(SEM)、差热分析(DSC)、动态力学性能(DMA)、宽角X射线(WAXD)和接触角对支架结构与形态、力学性能、结晶性能及亲水性进行了表征;通过加酶在缓冲溶液中的降解,研究了其降解性能;将体外培养的真皮成纤维细胞接种至材料表面,用扫描电镜观察成纤细胞在材料表面的生长情况。具体研究结果如下:1.以二氯甲烷/DMF(60:40)为溶剂,制备了PHBV、PLLA、PHBV/PLLA的电纺超细纤维;同时平行讨论了以氯仿/DMF(60:40)为溶剂制备PLLA、PCL、PLLA/PCL电纺纤维膜的工艺过程。研究发现:以氯仿/DMF(60:40)、二氯甲烷/DMF(60:40)适合做PLLA、PHBV、PCL及其混合物的溶剂,所制备的纤维直径均一且呈相互连通的多孔网状结构。2.电纺过程中,纤维的高分子链产生一定的排列和高度取向,但由于纤维的固化速度快,高分子链来不及进行规整排列而形成结晶,因此,DSC和XRD的结果都显示,PLLA、PCL静电纺纤维毡的结晶度要比相应的膜低。对于PHBV纤维毡而言,在静电纺丝过程中,由于其结晶速度较快,溶剂快速挥发使结晶受阻现象未出现,所以结晶度不降反升。3.在加酶降解的过程中,不同比例的PHBV、PCL与PLLA电纺纤维膜在脂肪酶、脂肪酶(猪胰)中降解速度明显加快,降解速度远远快于未加酶及普通膜的降解速度。所得电纺膜中随着所含聚乳酸的比例增加,降解速度明显加快,这是因为PCL、PHBV降解过程产生的小分子酸也能间接催化聚乳酸降解。降解过程中电纺纤维膜的失重率和吸水率与降解时间而增加。4.对PLLA/PCL(60:40)的电纺膜通过三种气体对其进行低温等离子体改性,研究比较发现,改性后的膜接触角较之前有明显降低,表明材料的亲水性增强。将改性后的支架材料接枝透明质酸,采用MTT法和扫描电镜研究成纤维细胞在改性前后材料表面的生长和增值情况,评价改性后PLLA/PCL(60:40)电纺纤维支架的相容性。结果表明:改性接枝支架细胞增值能力得到显著提高,预示在组织工程支架领域将有着良好的应用前景。
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