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目的 机体创伤后出现HSP70、TNF-a、氧自由基等指标的病理变化,但复合高温高湿这一特殊环境因素后,上述指标是否有其独特的变化规律。本实验旨在通过高温高湿环境下犬肢体火器伤后外周血和创伤弹道骨骼肌中HSP70、TNF-a、氧自由基含量的变化,以及热适应对这些指标变化的影响,为高温高湿环境下肢体战创伤的救治提供理论依据。 方法 杂种犬18只随机分为三组,高温高湿组、常温常湿组、热适应组,每组6只(6侧后肢)。于单侧股部肌肉最丰满处致伤,避开骨骼和大血管,伤后立即简单包扎止血,置入人工气候室舱,进行以下三部分的检测: (1)采用Western dot Blot方法检测实验犬不同时间点外周血淋巴细胞和伤道骨骼肌中每mg组织蛋白HSP70含量。 (2)采用ELISA法方法检测实验犬不同时间点外周血和伤道骨骼肌中TNF-a的含量。 (3)采用荧光检测法、MTT法分别测定实验犬不同时间点外周血和伤道骨骼肌中MDA、SOD的含量。 结果 (1)HSP70的变化 热休克蛋白的含量在高温高湿因素复合枪伤因素的影响下出现两个高峰,火器伤后细胞应激性合成热休克蛋白起保护作用,在伤后4h形成第一个高峰,应激过后合成减少;随后由于高温高湿作用导致保护性的合成热休克蛋白增多,伤后10h形成第二个高峰。14h后高温高湿组HSP70的含量均低于其他两组。热适应可以显著提高机体HSP70基础值和在火器伤后14h的含量。(2)TNF-a的变化 三组伤后TNF-a含量均有升高,三组曲线形状基本一致,三组峰值比较相互之间都有显著性差异,P<0.05,高温高湿组最高,常温常湿组最低,说明创伤及高温高湿均可增加TNF-a的表达,二者复合因素可以叠加升高的幅度。骨骼肌中TNF-a含量明显高于外周血中的含量。 (3)氧自由基的变化 血浆中 MDA在常温常湿组 10 h达到高峰,峰值以及14-18 h的含量低于其他两组,P<0刀5,热适应组升高幅度较高温高湿组低,24 h三组无差别。三组骨骼肌中 MDA含量在 18 h后无差异。红细胞中 SOD含量在热适应组 6 h以后含量显著高于高温高湿组,P<0刀5,sh达到高峰,和常温常湿组的峰值无差异。高温高湿组SOD含量6h达到峰值,6h以后的含量与其他两组相比显著性降低。伤道骨骼肌中高温高湿组 SOD含量在火器伤 10 h后结果未测出,其他两组在火器伤 14 h后未测出,而且数值均较红细胞中的含量低。 结论 ()高温高湿、枪伤两种因素都可以诱导机体表达 HSP70,进而参与机体的应激耐受,且具有叠加作用。(2)本实验显示 hFa与MDA的升高呈正相关,提示hFa和脂质过氧化反应对机体损伤有协同作用。()SOD和MDA的含量在高温高湿火器伤伤后14 h内呈正相的趋势,提示机体应激状态下可引起SOD等抗氧化酶的大量表达,从而桔抗脂质过氧化反应。u)高温高湿环境火器伤 1418 h以后伤道骨骼肌坏死因素在机体的损伤中起主导地位,提示对高温高湿环境下火器伤的处理应在 10 h以前尽早完成初期外科处理外,并同时行抗感染、抗氧化等的非外科处理,以遥免组织的继发损伤。(5)热适应可诱导HSP70表达,抑制高温高湿下机体火器伤后MDA、TNFa的升高,发挥其预防性的抗热损伤作用。