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目的:研究不同浓度的茶多酚诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其与BCL-2和BAX的表达的关系,探讨茶多酚在治疗肝癌方面的作用。
方法:本实验用茶多酚作用于人肝癌HepG2细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法,苏木精-伊红(HE)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法、免疫组化法检测bcl-2与bax表达等方法,观察HepG2细胞经不同浓度茶多酚作用不同时间后细胞增殖与凋亡的变化,以研究茶多酚诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用及其与bcl-2和bax表达的关系,为预防和治疗肝癌提供理论依据。
结果:本实验以不同浓度茶多酚作用于HepG2细胞不同时间后,通过HE染色观察到细胞凋亡特征性形态学改变。50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml、800ug/ml的茶多酚对HepG2细胞的抑制率分别为(24.20±2.12)﹪,(31.15±1.69)﹪,(52.01±1.12)﹪,(59.10±0.49)﹪,(71.96±0.68)﹪。以浓度为50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml茶多酚处理24h后,细胞凋亡率分别为(7.00±2.58)﹪,(12.20±3.12)﹪,(22.20±2.90)﹪,(39.20±3.26)﹪;48h后的细胞凋亡率分别为(12.60±3.20)﹪,(23.18±2.40)﹪,(38.40±2.50)﹪,(51.10±2.85)﹪;72h后的细胞凋亡率分别为(24.00±2.58)﹪,(38.80±2.97)﹪,(52.60±3.20)﹪,(62.20±4.92)﹪。与对照组的(1.60±1.58)﹪和(1.80±1.03)﹪和(2.10±1.85)﹪比较均有显著性差异。以浓度为50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml茶多酚处理24h后bcl-2的阳性率分别为(70.90±3.38)﹪,(61.50±4.50)﹪,(45.40±4.30)﹪,(34.40±4.35)﹪;48h后bcl-2的阳性率分别为(59.10±4.20)﹪,(50.70±3.68)﹪,(39.90±2.60)﹪,(26.90±3.60)﹪;72h后bcl-2的阳性率分别为(54.00±4.11)﹪,(43.20±3.39)﹪,(29.10±3.28)﹪,(21.30±2.21)﹪。与对照组的(77.50±4.25)﹪和(72.40±4.74)﹪和(63.20±4.91)﹪比较均有显著性差异。以浓度为50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml茶多酚处理24h后bax的阳性率分别为(3.10±2.02)﹪,(10.70±1.89)﹪,(21.20±2.93)﹪,(30.5±2.55)﹪;48h后bax的阳性率分别为(4.80±3.47)﹪,(20.70±1.89)﹪,(31.40±2.22)﹪,(40.90±2.77)﹪;72h后bax的阳性率分别为(9.10±2.23)﹪,(30.30±1.89)﹪,(40.80±2.78)﹪,(49.90±2.85)﹪。与对照组的(1.80±1.40)﹪和(2.20±0.92)﹪和(2.50±1.43)﹪比较均有显著性差异。随着茶多酚浓度的增高和作用时间的延长,bcl-2的阳性率逐渐下降,bax的阳性率逐渐升高。
结论:1.50~400ug/ml的茶多酚可以抑制人肝癌细胞HepG2的增殖并诱导其凋亡。
2.随茶多酚浓度和作用时间的增加,HepG2细胞中bcl-2表达逐渐下降,bax表达逐渐升高;茶多酚诱导HepG2细胞凋亡的机制可能与bcl-2和bax表达的变化有关。