树上干杏再生体系的建立与多倍体诱导

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caesarm4
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论文以新疆树上干杏种子和茎段为材料,系统研究了其组织培养与再生体系建立的过程,对各个培养阶段的主要影响因素进行了探讨,并采用化学方法对其进行多倍体诱导,为新疆杏品种开展生物技术育种奠定了基础,现得结果如下:   关于树上干杏再生体系建立的研究:种子消毒处理以75%乙醇溶液处理30s,0.1%升汞溶液处理30s,15%双氧水溶液处理20min,灭菌无菌水冲洗6次效果较好,平均发芽率和污染率分别为87.5%和12.5%。茎段消毒处理为75%乙醇溶液处理30s,0.1%升汞溶液处理5min,15%双氧水溶液处理20min,灭菌无菌水冲洗6次效果较好,发芽率和污染率分别为89.6%和8.9%。茎段的取材以当年春季新抽出的枝条最好,发芽率高污染率低。以茎段为材料诱导不定芽最适培养基:改良MS+1.0mg/LTDZ+0.1mg/LNAA,出芽率可达90.8%。不定芽增殖培养的最佳培养基:QL+0.4mg/L6-BA+0.04mg/LIBA,增殖倍数可达5.2,新生苗平均高度为3.1cm。诱导生根的最佳培养基为:1/2DKW+0.4mg/LIBA。接种后暗培养12d生根效果最好,生根率达到83.3%,平均每株生根数目为4条,生根指数为499.8。   关于多倍体诱导的研究:茎段浸泡法诱导杏多倍体,以0.4%秋水仙素溶液浸泡1d得到的变异率最高,可达15.8,再生率为15.8。茎段混培法诱导杏多倍体,以在含0.2%秋水仙素的培养基里培养10d得到最多变异株,变异率为20%。种子浸泡法诱导杏多倍体,以0.5%秋水仙素溶液处理24h效果比较好,其发芽率和变异率分别是35%和15%。茎尖涂抹法诱导杏多倍体,以0.3%的秋水仙素溶液对茎尖处理的效果最好,存活率为71.4%,变异率为21.4%。变异株在诱导初期与对照株形态学上存在差异,如叶片面积变小,叶片长宽比由1.58变为1.14,节间长度由2.49cm变为1.58cm。变异株与对照株的气孔对比,气孔增大,密度减小。变异株与对照株气孔大小分别为27.30μm×19.55μm和17.20μm×13.85μm(长×宽),气孔密度分别为62.0mm-2和109.0 mm-2。5颗变异株经流式细胞仪检测,最终确定有2株四倍体植株,1株嵌合体植株,2株二倍体植株。
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