子痫前期血清诱导血管内皮细胞产生炎性因子与乌司他丁的阻断效应

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目的:体外培养条件下,在明确子痫前期血清诱导脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生NO和TNF-α等炎性因子的基础上,进一步探讨不同浓度的乌司他丁对内皮细胞炎性因子释放的阻断作用,从血管内皮细胞角度研究子痫前期患者的体内炎性状态、血管通透性增高以及蛋白尿的发生机制,也为子痫前期的治疗提供前期的实验基础。方法:以体外培养的HUVEC为研究细胞,按以下分组进行实验:①空白对照组:在细胞培养体系中加入与血清等体积的DMEM培养基;②正常妊娠组:在细胞培养体系中加入正常妊娠妇女血清干预,终浓度为15%;③子痫前期组:在细胞培养体系中加入子痫前期血清干预,终浓度为15%;④乌司他丁组:以子痫前期组为基础,在细胞培养体系中加入子痫前期血清时,同时加入乌司他丁,终浓度分别为50U/L、100U/L、500 U/L、1000U/L,上述各组处理时间均为24h;其中,采用硝酸还原酶法检测培养上清液中NO的水平,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR法检测各组细胞iNOS的表达水平;采用ELISA法检测培养上清液中TNF-α的水平。结果:1.正常妊娠组NO表达水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P >0.05);子痫前期组NO表达水平比空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P <0.001);子痫前期组NO表达水平较正常妊娠组显著增高,差异有统计学意义(P <0.001);乌司他丁组NO表达水平与子痫前期组比较,除50U/L组差异无统计学意义(P >0.05)外,其余浓度组均降低,差异均有统计学意义(P均<0.01)。2.正常妊娠组iNOS表达水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);子痫前期组iNOS表达水平比空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P <0.001);子痫前期组iNOS表达水平较正常妊娠组显著增高,差异有统计学意义(P <0.001);乌司他丁组iNOS表达水平与子痫前期组比较,除50U/L组差异无统计学意义(P >0.05)外,其余浓度组均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。3.正常妊娠组TNF-ɑ表达水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);子痫前期组TNF-ɑ表达水平比空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P <0.001);子痫前期组TNF-ɑ表达水平较正常妊娠组显著增高,差异有统计学意义(P <0.001);乌司他丁组TNF-ɑ表达水平与子痫前期组比较,除50U/L组差异无统计学意义(P >0.05)外,其余浓度组均显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论:子痫前期血清可以激活且诱导血管内皮细胞释放炎性因子NO与TNF-α,是子痫前期过度炎症反应的重要机制之一;而一定水平的乌司他丁可抑制子痫前期血管内皮细胞释放的炎性因子,可考虑把乌司他丁作为抗炎内皮细胞保护剂应用于临床。
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