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本文研究了大豆蛋白过敏对仔猪生长性能和肠道功能的影响,分析了大豆蛋白各组分致敏性,在此基础上鉴定获得含IgE过敏抗原表位的短肽氨基酸序列,并以其为免疫抗原成功制备了单克隆抗体,为今后开展仔猪肠道健康调控、大豆蛋白致敏机理及致敏原检测技术研究提供依据和保障。论文共分三部分：试验一：大豆蛋白过敏反应对仔猪生长性能及肠道功能影响。试验选用品种相同、胎次及体况相近母猪所产仔猪8窝,随机分为2组,每组4个重复,每重复1窝。对照组饲喂无大豆蛋白日粮,试验组饲喂含32%去皮豆粕日粮。试验仔猪7日龄补饲,28日龄断奶,至49日龄结束。试验结果表明：(1)与对照组相比,试验组仔猪日增重降低37.5%(P<0.01),料重比增加59.9%(P<0.05)；(2)试验组仔猪28、35日龄血清中,二胺氧化酶(DAO)活性分别比对照组提高了22.9%(P<0.05)、13.6%(P<0.05),内毒素(ET)浓度分别比对照组提高了37.0%(P<0.05)、20.0%(P>0.05),D-乳酸(D-LAC)浓度分别比对照组提高了30.0%(P<0.05)、28.0%(P<0.05),D-木糖(D-Xylose)浓度则分别降低了29.0%(P<0.05)、11.1%(P>0.05)。上述结果提示由大豆蛋白引起的仔猪过敏反应,使仔猪肠道功能受损,营养物质吸收减少,有害物质进入体内,最终导致仔猪生长性能下降。试验二：大豆蛋白IgE抗原表位研究。采用间接ELISA方法遴选大豆蛋白过敏阳性仔猪血清,以其作为一抗采用免疫印迹技术分析大豆蛋白各组分的致敏性。根据β-伴大豆球蛋白α亚基氨基酸序列,合成7条短肽,通过致敏性分析,鉴定含IgE抗原表位的短肽。结果明：(1)免疫印迹图谱显示,β-伴大豆球蛋白α、α’、β三个亚基均可与阳性血清反应,是大豆蛋白的主要致敏原组分,可引起IgE介导的过敏反应。(2)间接ELISA结果显示,7条短肽均能与阳性血清中的IgG产生特异性反应,其中肽7的OD值最高(即血清中相应的特异性抗体含量最高)；4条短肽能与阳性血清中IgE产生特异性反应,同样肽7的OD值最高(即血清中相应的特异性抗体含量最高)。由此可见,本试验所合成的7条短肽中,肽7的致敏性最强,可作为制备单克隆抗体的抗原。试验三：β-伴大豆球蛋白单克隆抗体制备及鉴定。采用试验二鉴定得到的含IgE抗原表位短肽作为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，经克隆和间接ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗β-伴大豆球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Western blot分析表明,该单克隆抗体能特异地与β-伴大豆球蛋白反应。间接ELISA测定表明,腹水效价为1：32000。亚类鉴定结果表明,该单克隆抗体为IgGl型,轻链为κ链。p-伴大豆球蛋白单克隆抗体的成功制备,为建立基于抗原表位的大豆蛋白致敏原检测技术奠定了基础。