论文部分内容阅读
阿奇霉素(azithromycin)为半合成的十五元大环内酯类抗生素,是广泛应用于临床的抗菌药物。本文采用液相色谱-串联质谱法(LC/MS/MS)进行阿奇霉素在人体内的药物动力学研究；采用液相色谱-离子阱质谱法(LC/ESI-MSn)进行阿奇霉素在大鼠、比格犬和人体内的代谢研究。1.阿奇霉素在人体内的药物动力学研究本文建立了专属、灵敏的LC/MS/MS法测定人血浆中阿奇霉素的浓度,并用于受试者口服阿奇霉素后的生物等效性研究。血浆样品以克拉霉素作为内标,经液-液萃取后,以甲醇-水-甲酸(75：25：0.5,v／v／v)作为流动相,采用Zorbax Eclipse XDB C8柱分离,通过电喷雾离子化串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 375→m/z 591(阿奇霉素)和m/z 748→m/z 158(内标克拉霉素)。阿奇霉素的线性范围为1.0-1000 ng／mL,定量下限为1.0 ng／mL25名健康受试者口服含阿奇霉素0.5 g的阿奇霉素颗粒(受试制剂Ⅰ)、阿奇霉素片(受试制剂Ⅱ)和阿奇霉素片(参比制剂)后主要药动学参数Tmax分别为(1.9±0.6)、(1.9±0.7)和(1.8±0.6)h；Cmax分别为(441.0±129.5)、(421.7±142.8)和(426.2±128.1)ng/mL；t1/2分别为(48.0±10.7)、(44.8±8.0)和(45.6±9.8)h。用梯形法计算,AUC0-t分别为(4564.6±1312.0)、(4743.1±1616.1)和(4654.6±1489.4)ng·h/mL；AUC0-∞分别为(5224.6±1529.7)、(5373.4±1854.7)和(5278.7±1675.9)ng·h/mL。以AUC0-t计算,阿奇霉素颗粒和片剂的相对生物利用度分别为(99.7±14.0)和(101.8±13.8)%。根据双单侧检验结果,证明阿奇霉素颗粒(受试制剂Ⅰ)和阿奇霉素片(受试制剂Ⅱ)与阿奇霉素片(参比制剂)具有生物等效性。2.阿奇霉素的药物代谢研究利用化学合成法制备得到3种并购买到1种阿奇霉素代谢产物对照品,分别为去红霉糖阿奇霉素、3＇-N-去甲基阿奇霉素、9a-N-去甲基阿奇霉素和9a-N-去甲基去红霉糖阿奇霉素,通过电喷雾离子化质谱和核磁共振光谱确定了它们的化学结构,并总结出阿奇霉素及其代谢产物的ESI质谱断裂规律,以此为基础推测阿奇霉素未知代谢产物的化学结构。本文采用LC/ESI-MSn分析方法进行阿奇霉素在大鼠和比格犬体内的代谢研究,并且首次研究了其在中国人体内的代谢情况。结果共发现11种代谢产物,10种为已知代谢产物,1种为首次发现的代谢产物,共确证了4种阿奇霉素主要代谢产物的化学结构,其中3种为首次确证的结构(去红霉糖阿奇霉素、3＇-N-去甲基阿奇霉素和9a-N-去甲基去红霉糖阿奇霉素)。健康受试者口服阿奇霉素片500 mg,收集不同时间的尿液样品进行分析,除原形药物外共发现8种代谢产物。阿奇霉素在人体内主要代谢生成3＇-N-去甲基去红霉糖阿奇霉素、3＇-N-去甲基,9a-N-去甲基阿奇霉素、3＇-N-双去甲基阿奇霉素、9a-N-去甲基阿奇霉素、3”-O-去甲基阿奇霉素、3＇-N-去甲基阿奇霉素、阿奇霉素内酯环部分单羟基化代谢产物和阿奇霉素胺基糖部分单羟基化代谢产物。综合以上结果,阿奇霉素在人体内有4种主要代谢途径,包括O-去甲基、N-去甲基、N-去甲基后去红霉糖和羟基化。大鼠与人体内的代谢情况相似,仅多了1种去红霉糖阿奇霉素代谢产物。在比格犬体内发现了2种人和大鼠体内未检测到的代谢产物,分别为9a-N-去甲基去红霉糖阿奇霉素和本试验中首次发现的Ⅱ相的阿奇霉素胺基糖部分硫酸化代谢产物。