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目的:建立重症急性胰腺炎大鼠模型,给予清胰解毒汤灌胃治疗,检测血中胃动素、淀粉酶含量,藉以评价清胰解毒汤对胃动素的作用,探讨其治疗重症急性胰腺炎的药理作用机制,为临床应用提供实验基础,为筛选有效方药提供理论根据。 方法:SD雌雄性普通级大鼠,适应性饲养一周,选择雌雄大鼠各4只,进行预实验,剩余48只,随机分为6组,每组8只,分别是:空白组,重症急性胰腺炎模型组,中药低剂量组,中药高剂量组,奥曲肽+中药低剂量组,奥曲肽组。空白组:大鼠禁食24小时,不禁水,分别给予实验大鼠腹腔注射生理盐水,40ml/kg,分三次注射完毕,中间间隔1小时,实验大鼠于造模2小时后给予生理盐水7.5ml/kg,灌胃,6小时一次,共四次。取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化。重症急性胰腺炎模型组:先配制好20％的左旋精氨酸溶液,测PH值为11.80,用浓盐酸将左旋精氨酸溶液调至PH值7.4左右,11时20分开始造模,分别给予大鼠精氨酸溶液,剂量为3mg/g,共3次,中间间隔1小时,造模后大鼠禁食24小时,不禁水,取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化,确定造模成功。中药低剂量组:造模方法同重症急性胰腺炎组,实验大鼠于造模2小时后给予中药清胰解毒汤颗粒8.9g/kg,给药体积为7.5ml/kg,中药低剂量灌胃治疗组按公式Db=Da×Kb/Ka(成人用量相当于生药为每日105g,按体重60kg计算,其剂量Da为1.75g/kg,查表Kb:0.71,Ka:0.11。Db为大鼠每千克体重用药量,Da为成人每千克体重用药量,kb、ka为用药量常数),得出Db=11.3g/kg,浓度为1.189g/ml,每6小时灌胃一次,共4次,取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化。中药高剂量组:造模方法同重症急性胰腺炎组,造模后2小时后,给予中药清胰解毒汤颗粒44.5g/kg,因高剂量组5倍剂量不能溶解,故改为10ml/kg,每6小时灌胃一次。取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化。奥曲肽+中药低剂量组:造模方法同重症急性胰腺炎组,造模2小时后,将奥曲肽0.1mg溶于5ml生理盐水中,给0.5μg/100g,于造模后大鼠四肢部皮下注射,中药以8.9g/kg,给药体积为7.5ml/kg灌胃,均为6小时一次。取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化。奥曲肽组:造模方法同重症急性胰腺炎组,造模2小时后,将奥曲肽0.1mg溶于5ml生理盐水中,给0.5μg/100g,于造模后大鼠四肢部皮下注射,每6小时一次。取血测胃动素和血淀粉酶,取组织观察病理变化。以上造模方法均参考赖铭裕,梁志海,唐国都,孙学成等发表的腹腔注射左旋精氨酸诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型的文章。胃动素的测定:取动脉血2ml,注入含7.5%的EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中,混匀,4℃离心,3500rpm,离心10min,分离血浆,取上清测定,结果计算:以B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/BO计算标准及待测样品结合率百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。 结果: 血清胃动素及淀粉酶: 1.空白组与重症急性胰腺炎模型组:重症急性胰腺炎模型组血淀粉酶水平高于空白组,胃动素低于空白组,二者统计学有差异。(P<0.05) 2.空白组与中药低剂量组、中药高剂量组、奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组,空白组血淀粉酶水平低于其他组,胃动素高于其他组,统计学有差异。(P<0.05) 3.重症急性胰腺炎模型组与中药低剂量组、中药高剂量组、奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组:重症急性胰腺炎模型组血淀粉酶水平高于中药低剂量组、中药高剂量组、奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组,胃动素低于中药低剂量组、中药高剂量组、奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组,统计学有差异。(P<0.05) 4.中药低剂量组与中药高剂量组、奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组:中药低剂量组与中药高剂量组、奥曲肽组淀粉酶水平及胃动素水平无明显差异。(P>0.05),中药低剂量组与奥曲肽+中药低剂量组,中药低剂量组血淀粉酶水平高于奥曲肽+中药低剂量组,胃动素低于奥曲肽+中药低剂量组,二者统计学有显著差异。(P<0.01) 5.中药高剂量组与奥曲肽+中药低剂量组、奥曲肽组:中药高剂量组与奥曲肽组,血淀粉酶、胃动素无明显差异,(P>0.05),中药高剂量组血淀粉酶水平高于奥曲肽+中药低剂量组,胃动素低于奥曲肽+中药低剂量组,二者统计学有差异。(P<0.01) 6.奥曲肽+中药低剂量组与奥曲肽组:奥曲肽+中药低剂量组血淀粉酶水平低于奥曲肽组,胃动素高于奥曲肽组,二者统计学有差异。(P<0.01) 病理表现: 空白组:正常组大鼠腹腔未见明显异常,胰腺呈灰粉红色,分叶甚多,表面有薄层疏松结缔组织深入胰腺内将胰腺分隔为许多小叶,无胃潴留、腹水、肠壁水肿坏死,镜下胰腺组织结构紧密,细胞结构完整。 重症急性胰腺炎模型组:SAP模型组大鼠的胰腺组织明显的充血水肿,颜色变暗,色泽加深,体积增大,并见多个暗褐色坏死灶,胰腺周围的脂肪组织可以见到脂肪皂化斑,可见胃潴留、大量血性腹水、肠壁水肿坏死。镜下可见胰腺正常结构消失,腺体呈片状坏死,大量淋巴细胞和中性粒细胞浸润,被膜下及间质水肿明显。 中药低剂量组、中药高剂量组、中药低剂量组加奥曲肽组、奥曲肽组:大鼠的胰腺组织大部分充血、水肿减轻,色泽较浅,坏死灶较少,胰腺周围脂肪组织的皂化斑的出现也较小,胃潴留、血性腹水、肠壁水肿坏死也较轻,其中中药低剂量加奥曲肽组和奥曲肽组的疗效更明显。镜下表现:与SAP模型组比较,奥曲肽组、奥曲肽组加中药低剂量组、中药高剂量组、中药低剂量组胰腺小叶组织多为局灶或小片状坏死,出血、坏死较轻。 结论:通过实验证明,清胰解毒汤对重症急性胰腺炎大鼠血清淀粉酶有降低作用;能提高胃动素水平,减轻肠麻痹、促进胃肠蠕动,减轻大鼠胰腺组织的炎症反应,从而为临床用药提供有效的证据,但是具体作用位点尚不明确,有待于在以后得科研中进一步观察。