【摘 要】
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麦瓶草(SileneconoideaL.),为石竹科(Caryophyllaceae)蝇子草属(Silene)的一年生或越年生草本植物,常生于麦田中或荒地草坡,是冬小麦田常见的一种阔叶杂草。近年来由于麦田除
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麦瓶草(SileneconoideaL.),为石竹科(Caryophyllaceae)蝇子草属(Silene)的一年生或越年生草本植物,常生于麦田中或荒地草坡,是冬小麦田常见的一种阔叶杂草。近年来由于麦田除草剂的使用,麦瓶草的数量急剧下降,但在一些地区麦瓶草仍时有发生。本研究使用自主开发的麦瓶草SSR分子标记和抗药性常规鉴定技术对其遗传多样性和抗药性进行研究,其结果为防止麦瓶草在作物田的再猖獗,阻止其抗药性品种的发生与传播有重要的实践指导意义。主要研究结果如下:(1)采用磁珠法成功构建了麦瓶草的SSR富集文库,从此文库中挑选扩增长度为400-1000bp的克隆154个进行测序,其中含有SSR序列的高达121条,得率达78.57%。从这些序列中挑选合适的30条序列进行引物设计并合成,最终得到20对引物,这些引物在所有测试群体中都可以得到清晰明亮的PCR目的条带。为了能在ABI3730测序仪上进行检测分析,在每条正向引物的5’端加上荧光接头,经筛选,其中13对SSR引物仍可以得到清晰单一的目的条带,最终选择这13对引物对9个群体的176个个体进行了 PCR扩增检测。(2)运用Arlequin311软件对麦瓶草9个群体共176个个体的检测数据进行分析。结果表明,群体内等位基因从1到19个不等。对9个群体进行统计比较,各群体平均等位基因数目从2.9到3.9,群体间差异不大,其中FHS群体平均等位基因数目最高,为3.9,而WL群体平均等位基因数目最少,为2.9。观测杂合度SQ群体最高(0.515),而FHS群体最低(0.337)。预期杂合度LB群体最高(0.500),而WX群体预期杂合度最低(0.336)。对于麦瓶草的9个群体来讲,平均观测杂合度为0.415,预期杂合度平均值为0.414。在物种水平上,等位基因数目从2到31不等,平均为8.3个;观测杂合度平均为0.416,预期杂合度平均为0.509。(3)瓶颈效应检测发现,在1AM,TPM和SMM三种模型下,均显示LB群体近期经历了瓶颈效应;在IAM模型下检测出6个有用药历史地区的群体(WX,LB,SQ,KF,XC,WL)都表现为显著或者极显著的杂合度过剩,可能经历过瓶颈效应,而从未施药的3个群体FHS,LY,HX未表现出杂合度过剩,符合突变-漂移平衡,说明这三个地区的麦瓶草群体未经历过瓶颈效应。(4)分别用整株实验测定法和种子生物测定法对长期用药地区温县麦瓶草群体和从未用药地区凤凰山群体做抗药性检测试验,结果是长期施药地区的麦瓶草对苯磺隆产生了一定的抗药性,整株实验测定法检测出抗性倍数为2.05,种子生物测定法检测其抗性倍数为10.2。
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