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本文以具有良好的生物活性和生物相容性的纳米羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HAP)为研究对象,在前期研究工作的基础上,进一步对其悬浮稳定性、荧光标记以及与细胞之间的相互作用进行了研究,同时初步探索了HAP纳米线、纳米管的制备工艺。以羧甲基纤维素钠(CMCNa)为分散稳定剂,研究分散剂的添加量、超声分散时间等对纳米HAP水悬浮液稳定性的影响。通过物理吸附、化学接枝、原位标记、偶联剂预处理后再进行化学接枝的方法对HAP进行荧光素的标记,比较不同标记方法的标记效果、稳定性及其对荧光素荧光特性的影响。采用体外细胞培养技术对比研究了纳米HAP粒-子对正常细胞和肿瘤细胞活性的影响规律,并采用荧光标记HAP粒子示踪研究纳米HAP粒子在正常细胞和肿瘤细胞中的分布及其与细胞之间的作用。结合溶胶一凝胶合成工艺与模板法制备出HAP纳米线、纳米管。
结果表明,当用量为0.35wt%、超声时间为150s时,CMCNa.能有效地分散纳米HAP颗粒,得到均匀、稳定的纳米HAP水悬浮液体系。CMCNa对纳米HAP悬浮液的稳定分散作用主要通过颗粒间的静电作用和空间位阻来实现。物理吸附、化学接枝、原位标记、偶联剂预处理后再进行化学接枝的方法都能有效地将荧光素标记于HAP上。物理吸附标记过程并未改变荧光素的荧光特性,而化学接枝、原位标记以及偶联剂预处理.化学接枝的标记过程都不同程度地对荧光素的荧光特性有所影响。物理吸附和化学接枝方法标记的粉末在水中的荧光稳定性较差,原位标记的粉末稳定性较好,但局限性较大;偶联剂预处理.化学接枝方法标记的粉末在水介质中具有较理想的荧光稳定性。体外MTT、比色法研究结果表明纳米HAP粒子对人正常肝细胞L-02的抑制率较小,而对肝癌细胞SMMC-7721有明显的抑制作用,且呈现明显的浓度和时间依赖性。荧光显微镜照片显示纳米HAP粒子能够诱导肝癌细胞SMMC-7721的凋亡。将溶胶-凝胶工艺与多孔阳极氧化铝(AAO)模板技术相结合,通过控制溶液的浓度和浸渍时间可制备结构均匀、彼此平行且高度有序的HAP纳米线和纳米管。