【摘 要】
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在农业生产中,随着复种指数的提高,植物病害发生越来越严重,每年因此而造成数千万元的经济损失,如何控制病害、维持植物的正常生长一直是科研工作者研究的热点。化学农药可以
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在农业生产中,随着复种指数的提高,植物病害发生越来越严重,每年因此而造成数千万元的经济损失,如何控制病害、维持植物的正常生长一直是科研工作者研究的热点。化学农药可以有效控制植物病害,并在防治中发挥着重要的作用。但是由于人们对化学农药的不合理使用,引起土壤、水体和大气的污染、农副产品中农药残留增加、直接威胁着人类的健康,加上病原菌的抗药性等问题,使新农药的开发难度及开发成本越来越高,促使人们去寻求新的安全有效的植物病害防治途径。利用自然界中的丰富的拮抗微生物资源,将其开发为生物农药,可以在很大程度上缓解这种局面。本研究以黄瓜蔓枯菌为指示菌,采用平板稀释法和对峙法对山东泰安、德州、潍坊、烟台、济南等地保护地黄瓜产区的105个土壤样品进行了拮抗菌的分离和筛选,获得了拮抗细菌菌株36株,拮抗放线菌菌株22株。筛选结果表明,土壤中的拮抗菌筛出率与蔬菜保护地连作时间的相关性达到显著水平。进一步以能否分泌几丁质酶为指标复筛拮抗菌,获得了3株细菌和3株放线菌,进行以下研究:1、测定了拮抗菌的抗菌谱,6株拮抗菌对供试的10种植物病原真菌(除黄瓜猝倒菌)均有拮抗作用。其中,D24、G8、A9和T111对黄瓜蔓枯菌和黄瓜菌核病菌具有较强的拮抗作用,抑菌率均达到80%以上。2、测定了培养基种类、pH值、培养温度对拮抗菌株产生拮抗能力的影响。抑菌活性最大的初步条件是:D24和G8选用豆芽培养基,pH值8.0-9.0,培养温度28℃;Sh34选用NA培养基,pH值7.5-8.5,培养温度31℃;T111选用LB培养基,pH值7.5-8.5,培养温度34℃;A9选用NA培养基,pH值7.0-8.0,培养温度26℃。3、对上述拮抗菌进行了鉴定。通过观察拮抗细菌G8和Sh34的菌落和菌体的形态,比较其生理生化指标及16s rDNA序列同源性分析,G8和Sh34被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过观察T111和A9的菌落和菌体形态,初步确定它们为链霉菌属(Streptomyces)。4、温室接种防病试验结果表明,细菌菌株G8和D24发酵液处理已接了黄瓜蔓枯菌的黄瓜苗,病菌检出率分别为32.5%和37.5%,放线菌株A9和T111处理后病菌检出率分别为57.5%和30%,对照为86.7%。在植物体内拮抗菌T111、G8和D24具有明显地抑制黄瓜蔓枯菌的效果,这与离体试验结果相符合,可见,拮抗菌释放的次生代谢产物是影响拮抗菌活体防效的主要因子之一。
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