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本研究根据GenBank上登录编号为J X317649.1猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株的基因序列设计相应引物，经过 PCR扩增获得猪繁殖与呼吸综合征病毒编码N蛋白（30KD）的基因片段ORF7（367bp）。连接于表达载体pET-32a，测序验证后将重组质粒转化表达宿主菌Rosetta，加入终浓度为0.7 mmol/L IPTG在37℃的摇床振荡培养5h后，经过SDS-PAGE检测显示表达菌能够高效表达可溶性重组N蛋白。将所获重组N蛋白进行亲和层析纯化，SDS-PAGE检测结果显示经过纯化获得单一的重组N蛋白；Westen-blot检测结果显示纯化所得的重组N蛋白能够特异性的与猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清反应。 使用纯化的可溶性重组 N蛋白包被酶标板，经过条件摸索后建立了可用于检测抗体的间接ELISA方法。本研究建立的间接ELIS A方法在检测其他病毒阳性血清时不出现交叉反应，具有良好的特异性；而且该方法的板内变异系数在1.04％-5.62%，板间变异系数在1.12%-4.25%，具有良好的重复性；其与IDEXX公司的PRRS V检测试剂盒同时检测30份临床样品，二者的符合率在93%，显示了二者具有较高的符合率。 利用纯化的重组 N蛋白免疫 BALB/c小鼠，免疫后获得脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，经过亚克隆以及筛选获得两株能够稳定分泌针对PRRSV的N蛋白单克隆抗体的两株杂交瘤细胞株2G4及1B8。本研究制备的针对PRRSV的N蛋白的特异性单抗可以为下一步建立特异性更强的快速检测试剂盒奠定基础。