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固有免疫系统是人体抵抗外来病原微生物感染的第一道防线。在病毒感染过程中，模式识别受体通过识别病毒中的病原相关分子模式并活化启动相关信号通路，从而抑制、抵抗病毒的感染。RLR是机体识别病毒RNA的主要受体，RIG-Ⅰ能够识别单链RNA病毒，双链RNA病毒以及具有5-pp和5-ppp的平末端RNA病毒，是疱疹性口炎病毒等RNA病毒的主要受体。泛素化修饰是细胞中蛋白质翻译后修饰的重要方式之一，是高度可逆的。泛素化修饰发生在细胞活动的各个阶段，在固有免疫应答中具有重要的作用。蛋白质的泛素化修饰类型包括K6，K11，K27，K29，K33，K48，K63几种，其中K48与K63多聚泛素化修饰的研究相对较为明确。K63泛素化修饰一般与底物蛋白的活性具有紧密关系，如RIG-Ⅰ在病毒感染后，需要经过K63泛素化修饰后才能够活化，进而激活下游信号通路。去泛素化修饰是蛋白质泛素化修饰的逆过程，由去泛素化酶催化。因此，去泛素化酶在蛋白质翻译后修饰中也具有重要的作用。 在前期实验中，用RNA病毒-疱疹性口炎病毒-感染RIG-Ⅰ稳定过表达的HEK293T细胞，利用免疫共沉淀实验和质谱分析，筛选到包括泛素特异性蛋白酶14在内的能够与RIG-Ⅰ相互作用的去泛素化酶分子。该结果提示泛素特异性蛋白酶14可能参与调控RIG-Ⅰ活化诱导的抗病毒免疫应答。在本研究中，发现泛素特异性蛋白酶14在抗病毒固有免疫应答中发挥负向调控作用。在小鼠腹腔巨噬细胞及人诱导分化的巨噬细胞系THP1细胞中，干扰泛素特异性蛋白酶14基因可以明显提高RIG-Ⅰ活化诱导的Ⅰ型干扰素、IL-6和TNF-α的产生，同时抑制疱疹性口炎病毒的复制。同样在这两种细胞中，IU1抑制泛素特异性蛋白酶14的活性后也会显著提高RIG-Ⅰ信号触发的的Ⅰ型干扰素、IL-6和TNF-α的表达，同时抑制疱疹性口炎病毒的复制。相反，过表达泛素特异性蛋白酶14会抑制RIG-Ⅰ活化诱导的IFN-β的mRNA表达并促进疱疹性口炎病毒复制。同时实验结果也证实泛素特异性蛋白酶14可负向调控RIG-Ⅰ诱导活化的NF-κB信号通路。分子机制上，利用双荧光素酶报告基因、免疫共沉淀及Immunoblot实验，发现泛素特异性蛋白酶14可以通过USP结构域与RIG-Ⅰ相互结合并促进其K63去泛素化;且疱疹性口炎病毒感染会促进Akt磷酸化，活化后的Akt催化泛素特异性蛋白酶14磷酸化而激活。本研究明确了泛素特异性蛋白酶14在抗病毒固有免疫应答中的作用及其相关机制，为RNA病毒感染性相关疾病的防治提供了新靶点。