【摘 要】
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目的验证构建闭塞性细支气管炎(Bronchiolitis Obliterans,BO)大鼠模型的方法,为进一步研究其病理机制提供实验基础;了解药物对模型大鼠肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达的影响,为BO
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目的验证构建闭塞性细支气管炎(Bronchiolitis Obliterans,BO)大鼠模型的方法,为进一步研究其病理机制提供实验基础;了解药物对模型大鼠肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达的影响,为BO的治疗提供新思路。方法将36只SD大鼠随机分为2组:A组--对照组(n=12)和B组--模型组(n=24);B组以经口一次性气管内滴入2,3丁二酮(Diacetyl,DA)的方法构建BO大鼠模型,药物用量为125mg,A组以蒸馏水代替药物,造模方法及用量同B组。7天后于A、B两组中分别随机取6只动物,构成2个亚组,分别标记为A1、B1;处死A1、B1组的12只大鼠,取肺组织,制作切片,行HE染色,光学显微镜下观察病理,以验证是否造模成功。剩余A组6只大鼠构成一个亚组,标记为A2,剩余B组18只大鼠随机分为3个亚组,标记为B2、B3、B4,每组6只,A2、B2、B3、B4共同构成实验第二部分的4个组别。4组大鼠以不同药物进行干预:A2、B2组大鼠以生理盐水灌胃,B3组大鼠以中药复方温阳通闭汤(导师赵坤教授经验方)灌胃,B4组大鼠以强的松水溶液灌胃;灌胃频次为日1次,周期为21天。灌胃结束次日对上述4组动物进行处理,测定肺功能,腹主动脉取血,分离肺组织,制作切片,苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色观察各组肺结构变化;MASSON染色观察肺组织胶原沉积情况;免疫组化试剂盒显色Ⅰ型、Ⅲ型胶原,Olympus光学显微镜观察、拍照,Image pro plus6.0图像分析系统测定各样本平均光密度值;SPSS17.0软件进行统计学分析。结果造模7天后,B1组大鼠肺组织可见细支气管管周黏膜增厚,纤维化表现,多处细支气管管腔狭窄,周围炎症细胞浸润,上皮细胞脱落或增生,形成典型的BO样改变,A1组基本正常;给予药物干预21天后,B3和B4组大鼠肺组织炎症和纤维化程度均轻于B2组;B4组Ⅰ型胶原沉积量低于其它各组,但显著性检验无差异(P>0.05);B3组Ⅲ型胶原沉积较其它各组明显减少,显著性检验有差异(P<0.01)。结论气管内一次性滴入DA提供了一种新的构建BO动物模型的方法,该法可行性强,可作为一种新的造模方法应用于BO的实验研究;强的松片对减少闭塞性细支气管炎大鼠Ⅰ型胶原的沉积可能有效;强的松片及中药复方温阳通闭汤对减少闭塞性细支气管炎大鼠Ⅲ型胶原的沉积均有效,在治疗效果上,中药温阳通闭汤优于西药强的松片。
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