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目的：利用哺乳动物细胞293T细胞表达含有西尼罗病毒（WNV) PrM-E的蛋白，自我组装成病毒样颗粒（virus-like particles，VLPs），改进优化转染等条件实现大规模转染293T细胞，获得大量的纯化蛋白，以此蛋白作为抗原研制检测西尼罗病毒抗体的ELISA试剂盒，用试剂盒来实现对我国出入境人员的血清进行调查。方法：筛选典型西尼罗病毒株，构建重组质粒，大规模转染293T细胞，优化转染的条件和方法，表达西尼罗病毒prM-E蛋白，获得大量的表达重组蛋白，通过间接免疫荧光实验验证表达抗原的完整性和特异性，纯化西尼罗病毒prM-E蛋白抗原，ELISA对表达产物进行鉴定制成大规模的检测试剂盒；采用蔗糖梯度离心10-60%结合超速离心纯化表达产物；将纯化的表达产物包被于聚苯乙烯微量反应板,与待检血清中抗WNV抗体反应后,经洗涤,再加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG与之结合,然后用TMB作用显色，建立间接ELISA方法，评价建立的间接ELISA方法对我国入境人员血清进行检测。结果：重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(virus like particles VLPs),优化转染的条件和方法，从转染的293T细胞从细胞的上清液中和细胞中的表达的蛋白的的纯化物中获得大规模的重组蛋白，通过间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白具有良好的抗原性；间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体;纯化得到的大量的蛋白包被成ELISA试剂盒，通过对来自西尼罗疫区的286份我国入境人员血清检测，与金标准美国FOCUS的WNV IgG检测试剂盒比较，ELISA-Lab阳性检出率为35.6%,FOCUS WNV IgG检测试剂盒则为32.5%，两者之间无统计学差异（X2=3.05，P=0.078>0.05),Kappa值为0.8372，两者具有良好的一致性，其中两者的阳性检出符合率为91.18%,阴性符合率为95.34%,总符合率为92.66%。结论：在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性；以西尼罗病毒样颗粒为抗原建立检测WNV抗体的间接ELISA方法，检测效果不亚于进口试剂盒，大规模转染细胞所纯化的西尼罗病毒的重组蛋白可以实现制成大规模商品化的试剂盒，可以以此试剂盒来对我国出入境人员进行血清学监测。