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免疫抑制剂是临床上常用的抑制机体异常免疫反应的药物，常用于器官移植的术后治疗之中。该类药物的治疗窗狭窄，血药浓度与肝肾毒性密切相关，因此，为了能最大程度发挥药物的疗效且避免毒副作用的产生，临床上有必要对其进行药物浓度监测。液相色谱-串联质谱方法(LC-MS/MS)是目前免疫抑制剂检测最为精密、准确和灵敏的方法。在临床应用中，大多数全血检测方法是对一种或两种免疫抑制剂进行检测，高通量的4种药物同时分析的报道相对较少，而新型干血斑采样技术用于免疫抑制剂高通量检测的报道更为少见。
本论文基于国内外免疫抑制剂的临床检测现状，从液相色谱条件、质谱条件和样品前处理条件的建立出发，详细地阐述了各条件的建立步骤，开发了相对于文献报道的方法更简单易行的全血中环孢菌素A(CsA)、西罗莫司(SIR)、他克莫司(TAC)、依维莫司(EVE)同时检测的LC-MS/MS分析方法，为临床提供了更方便、更高效的免疫抑制剂检测手段。根据美国临床实验室标准化协会的相关指南对方法的线性范围、定量下限、选择性、精密度和基质效应予以验证。结果均符合指南要求，其中CsA的线性检测范围为5.0~1250ng/mL，SIR、TAC、EVE的线性检测范围为0.5~125ng/mL，方法的精密度高、准确度好，完全符合免疫抑制剂的临床检测需求。
此外，本论文基于样本采血量少、保存和运输方便的干血斑(DBS)采样技术，在建立的全血检测方法基础上加以改进和创新，建立了一种精密度好、灵敏度高、特异性强的干血斑中CsA、SIR、TAC、EVE的同时检测的LC-MS/MS分析方法。该方法只需一滴全血(20μL)就可以准确检测出四种药物的浓度，且方法学验证结果均符合FDA的指南要求。其中CsA的线性检测范围为20~1000ng/mL，SIR、TAC、EVE的线性检测范围为2~100ng/mL。方法的提取回收率高(71~116%)，稳定性好(DBS样本在室温下至少可以存放5天)。干血斑检测方法和全血检测方法的Passing-Bablok相关性验证和Bland-Altman一致性分析显示了良好结果，证明了全血检测方法的良好重复性和DBS方法在未来临床应用上代替全血检测方法进行免疫抑制剂治疗药物监测的适用性和可行性。
本论文基于国内外免疫抑制剂的临床检测现状，从液相色谱条件、质谱条件和样品前处理条件的建立出发，详细地阐述了各条件的建立步骤，开发了相对于文献报道的方法更简单易行的全血中环孢菌素A(CsA)、西罗莫司(SIR)、他克莫司(TAC)、依维莫司(EVE)同时检测的LC-MS/MS分析方法，为临床提供了更方便、更高效的免疫抑制剂检测手段。根据美国临床实验室标准化协会的相关指南对方法的线性范围、定量下限、选择性、精密度和基质效应予以验证。结果均符合指南要求，其中CsA的线性检测范围为5.0~1250ng/mL，SIR、TAC、EVE的线性检测范围为0.5~125ng/mL，方法的精密度高、准确度好，完全符合免疫抑制剂的临床检测需求。
此外，本论文基于样本采血量少、保存和运输方便的干血斑(DBS)采样技术，在建立的全血检测方法基础上加以改进和创新，建立了一种精密度好、灵敏度高、特异性强的干血斑中CsA、SIR、TAC、EVE的同时检测的LC-MS/MS分析方法。该方法只需一滴全血(20μL)就可以准确检测出四种药物的浓度，且方法学验证结果均符合FDA的指南要求。其中CsA的线性检测范围为20~1000ng/mL，SIR、TAC、EVE的线性检测范围为2~100ng/mL。方法的提取回收率高(71~116%)，稳定性好(DBS样本在室温下至少可以存放5天)。干血斑检测方法和全血检测方法的Passing-Bablok相关性验证和Bland-Altman一致性分析显示了良好结果，证明了全血检测方法的良好重复性和DBS方法在未来临床应用上代替全血检测方法进行免疫抑制剂治疗药物监测的适用性和可行性。