论文部分内容阅读
红掌是有重要观赏价值和经济价值的花卉，市场前景广阔。红掌既不耐寒，也不耐热，一直在温室中生产，导致病害发生严重，病虫害防治已经成为生产高品质红掌，建立高效和可持续发展红掌产业的主要瓶颈之一。抗病品种选育是病虫害防治最有效的手段，已经成为红掌育种的热点之一。本研究以‘阿拉巴马’和‘053-1’红掌为材料，研究了红掌抗病突变体筛选技术，为采用细胞工程育种方法培育红掌抗病新品种奠定基础。主要研究结果如下： (1)背面向下接种，红掌‘053-1’叶片愈伤组织的诱导率最高，为92.34％；基本培养基对红掌‘053-1’叶片愈伤组织的诱导率无显著影响。植物生长调节剂和附加物对红掌愈伤组织的增殖和分化影响显著，当6-BA为0.5 mg·L-1，2，4-D为0.5 mg·L-1，培养基中附加5％椰汁时，‘阿拉巴马’愈伤组织的绝对生长速率最高，为711.93％，平均芽分化数9.80个/块；NAA浓度对红掌‘阿拉巴马’试管苗生根有显著影响，当NAA浓度为0.5 mg·L-1时，平均每株苗有1.19条根，平均根长为0.36 cm。 (2)镰刀菌毒素生产的最佳方法为：将OD600值为0.131镰刀菌菌液1 mL接种到100 mL PSC培养基中，在转速为120 r·min-1的摇床上于25℃黑暗条件下振荡培养5 d；立枯丝核菌毒素生产的最佳方法为：将OD600值为0.515立捎丝核菌菌液1 mL接种到100 mL PSC培养基中，25℃暗培养10 d，每隔12 h振荡一次，每次持续30 s。 (3)用0.4％EMS处理‘阿拉巴马’和‘053-1’愈伤组织1 h时，愈伤组织的存活率分别为44.44％和47.22％。表明0.4％EMS为半致死剂量。镰刀菌和立枯丝核菌粗毒素滤液对红掌愈伤组织的增殖和分化影响显著。将未经过EMS处理的愈伤组织接种到含有50％粗毒素滤液的培养基中培养30 d，在镰刀菌和立枯丝核菌粗毒素中‘阿拉巴马，愈伤组织的存活率分别为13.33％和13.89％，‘053-1’愈伤组织的存活率分别为19.45％和19.50％，因此将50％的粗毒素滤液浓度确定为抗病突变体筛选浓度。 (4)将经过0.4％EMS处理的红掌愈伤组织先后接种到含10％、30％和50％粗毒素滤液的培养基上进行突变体筛选，获得了在50％粗毒素滤液中存活的‘抗性愈伤组织’。将抗性和未经处理的愈伤组织分别转接到含50％粗毒素滤液的培养基上培养30 d，‘阿拉巴马’‘抗性愈伤组织’在镰刀菌和立枯丝核菌粗毒素中的存活率分别为6945％和83.34％，对照愈伤组织的存活率分别为22.23％和16.67％；‘053-1’‘抗性愈伤组织’的存活率均为86.11％，其对照愈伤组织的存活率分别为13.89％和19.45％。 (5)‘抗性愈伤组织’和对照愈伤组织在含毒培养基上培养时，除‘阿拉巴马，‘抗性愈伤组织’在镰刀菌毒素培养基上的SOD活性外，其它抗性愈伤组织的SOD活性均显著低于对照；‘阿拉巴马’‘抗性愈伤组织’在镰刀菌毒素和‘053-1，在立枯丝核菌毒素培养基上的MDA含量显著低于对照；除‘053-1’‘抗性愈伤组织，在立枯丝核菌毒素培养基上的POD活性外，其它抗性愈伤组织的POD活性显著低于对照。‘抗性愈伤组织’和对照愈伤组织在不含毒培养基上培养时，除‘阿拉巴马’‘抗立枯丝核菌愈伤组织’的SOD活性外，其它抗性愈伤组织的SOD活性显著高于对照；‘抗性愈伤组织’的MDA含量与对照差异不显著；‘053-1’‘抗立枯丝核菌愈伤组织’的POD活性显著高于对照，其它抗性愈伤组织的POD活性与对照无显著差异。 (6)获得‘053-1’和‘阿拉巴马’再生植株分别为46株和55株，通过接种鉴定，获得抗镰刀菌的‘053-1’和‘阿拉巴马’幼苗各5株，抗枯丝核菌的‘053-1，和‘阿拉巴马’幼苗分别为6株和8株。