【摘 要】
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2型猪链球菌（Streptococcus suis serotype 2，S. Suis 2)是一种重要的人畜共患病病原菌，能导致人和猪的脑膜炎、败血症以及突发性死亡，其致病机制目前仍不明确。二元信号转导系统
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2型猪链球菌（Streptococcus suis serotype 2，S. Suis 2)是一种重要的人畜共患病病原菌，能导致人和猪的脑膜炎、败血症以及突发性死亡，其致病机制目前仍不明确。二元信号转导系统在调节S. Suis 2型毒力相关基因表达以及调控细菌致病性等方面发挥着重要的作用。前期研究结果表明，TCSTS CovR是一个重要的全局性反应调节因子，对细菌的致病性具有负调控作用。在此基础上，本研究以S. Suis 2中国强毒株05ZYH33的基因组为模板，克隆表达了CovR，生物信息学分析显示，它具有典型的反应调控因子的结构特征，在进化上较为保守。PCR分析表明，在猪链球菌的35个血清型参考菌株中，covR基因普遍存在除血清20的所有血清型中；通过基因工程的方法，将covR基因分别克隆入pET32a和pQE30 两个表达载体后，在大肠杆菌中进行了原核表达，His亲和层析柱纯化获得CovR重组蛋白；以重组的 CovR 作为免疫原，免疫新西兰兔制备了高效价的兔抗 CovR 多克隆抗体；以CovR重组蛋白作为免疫原，免疫BALB/c小鼠，运用杂交瘤技术，获得了2株分泌抗CovR 单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备了抗CovR 单克隆抗体；间接ELISA检测结果显示，多克隆抗体和单克隆抗体均具有较高的效价； Western blot分析显示，多克隆抗体和单克隆抗体的特异性好。研究结果为进一步开展CovR的调控机理研究奠定了基础。
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