论文部分内容阅读
背景与目的：食管癌已成为威胁人类健康的高发肿瘤，全世界每一年死于食管癌的患者约30万。食管癌在我国属于高发恶性肿瘤，而且在我国食管癌的发病存在着地域性特点，比如在高发区食管癌的总发病率可＞100/10万，在男性肿瘤死亡率及发病率中排名第5位[1]。很多的食管癌患者由于早期没有明显症状，等确诊时往往已经处于晚期或发生转移，无法行手术切除。近年来尽管食管癌的相关治疗技术包括手术技术都得到了飞速发展，但是食管癌的生存率依然很低，据报道5年总生存率只有不到10%[2]。如何能早期发现并明确诊断食管癌有否淋巴结转移，从而进一步提高食管癌的临床治疗效果，减少复发率，从而延长患者生存期，提高患者的生存质量是我们未来在临床工作中面临的重大课题之一。肿瘤恶性生物学行为是影响恶性肿瘤临床疗效和预后差的主要原因。肿瘤主要的恶性生物学行为包含侵袭及转移，而其中远处转移有两方面：血行转移和淋巴转移。近年来，趋化因子（chemokines)在肿瘤细胞的转移和侵袭过程中的作用愈来愈受到肿瘤学家的关注。某些趋化因子与其相应的受体结合可以促进肿瘤淋巴管的生成以及肿瘤细胞沿淋巴管定向迁移[3]。趋化因子(chemokine)通常是由各种各样的细胞所产生的的前炎症性细胞因子，并可以在细胞的移动过程中产生趋化作用。它可以与细胞表面所对应的受体结合并可以在多种病生过程中发挥作用。目前有大量的相关研究已揭示肿瘤的发生、发展不单单取决于肿瘤细胞本身，在此过程当中，肿瘤微环境中的多种细胞，比如成纤维细胞，血管和淋巴内皮细胞、炎症细胞、巨噬细胞、免疫细胞等等，由这些细胞所构成的肿瘤生态系统(ecosystem)也担负着非常重要的角色和作用。目前得到普遍认同的“信号”(归巢)学说认为：肿瘤细胞向特定部位的转移是多种细胞间信号相互影响的结果，而在这些细胞因子中，趋化因子是一个非常重要的信号分子。在以往的研究中发现各种各样的肿瘤细胞都可以产生特异的趋化因子受体，而与其相对应的配体则可以在某些器官呈很高的表达水平。趋化因子与其受体在结合以后的作用包括：通过趋化作用使靶细胞迁移。此外还可以重排细胞骨架并介入和引导很多的病理及生理机制，尤其在肿瘤生长、侵袭和转移中起重要作用[4,5]。趋化因子20(chemokine ligand20)又被称为巨噬细胞炎症蛋白-3α (MIP-3α)，可多见于表达在肝脏细胞、皮肤角质上皮细胞和肠道上皮细胞等部位，其惟一的受体是CCR6。CCR6属7次跨膜的孤立受体，多见于表达在记忆性T细胞、未成熟树突状细胞、B细胞及中性粒细胞上。CCL20招募的主要是一部分抗原提呈细胞，可以趋化CCR6表达细胞往抗原表达的组织部位定向移动。目前有关CCR6及CCL20的研究多集中在乳腺癌、肝癌的转移上及结直肠癌肝转移相关的研究，而与食管鳞癌转移相关的研究尚处于初始阶段。本研究课题选取MaxVision快捷免疫组化两步法检测食管鳞癌组织中CCR6及CCL20的表达，并将癌旁组织作为对照，探讨二者在食管鳞癌的浸润和转移中的作用和关系。方法：采集食管鳞癌患者的癌组织切除标本和癌旁组织标本等临床资料。选用快捷免疫组化MaxVision两步法来检测食管鳞癌组织癌旁组织中的CCL20及CCR6的蛋白表达情况，并研究二者在各种不同的病理特性中表达的差异和意义。结果：1.在食管鳞癌癌组织中，CCR6与CCL20的蛋白表达呈特异性的升高(P﹤0.05),分别为癌旁组织的4.98倍与7.28倍。2.免疫组化结果显示CCL20主要在肿瘤细胞的胞质或胞膜中表达，癌旁组织细胞的上皮细胞也可见少量的表达。在70例肿瘤组织标本中，53例(75.7％)表达呈阳性，在20例癌旁组织标本中，6例(30％)表达呈阳性，二者的差异有统计学意义(P <0.05)。CCR6主要表达于肿瘤细胞的胞膜中，在70例肿瘤组织中，51例(72.9％)表达呈阳性，在20例癌旁组织标本中，有5例(25%)表达呈阳性，二者的差异有统计学意义(P <0.05)。3. CCL20的蛋白表达与食管鳞癌的肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤体积有相关性(P＜0.05)，而与年龄因素和性别因素无相关性(P＞0.05)；CCR6的表达与患者的TNM分期有相关性(P＜0.05)。与淋巴结转移也有相关性(P＜0.05)，与患者的年龄因素、性别因素、肿瘤大小及肿瘤分化程度无相关性(P＞0.05)。4.相关性分析显示, CCR6/CCL20在食管鳞癌组织中表达情况呈线性相关,r=0.325, P﹤0.05。结论：1.在肿瘤组织中，CCR6与CCL20的蛋白表达水平特异性的升高(P﹤0.05),分别为癌旁组织的4.98倍与7.28倍。同时CCL20及CCR6表达与食管鳞癌的淋巴结转移情况及食管癌的TNM分期有相关性。此外在Ⅲ~Ⅳ期食管鳞癌组织中CCL20及其受体CCR6蛋白阳性表达率（84.78%和80.43%）明显高于Ⅰ~Ⅱ期（58.33%和58.33%），肿瘤浸润深度越深和伴淋巴结转移组的食管鳞癌CCL20及其受体CCR6蛋白阳性表达率越高。由此推测，CCL20及其受体CCR6可能参与了食管鳞癌的发侵袭与发展。2.在食管鳞癌组织中CCL2的表达水平最高，在癌旁组织中CCR6的表达水平最高，提示CCL20可能在食管鳞癌的产生及进展的病理和生理过程中承担重要作用。