【摘 要】
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研究背景： 唾液是一种极好的检测介质，可通过无创检测手段监测健康状况及疾病发生、发展和治疗效果。因此，人类唾液具有巨大的潜在诊断价值，不仅可用于口腔疾病的诊断，而且可用
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研究背景：
唾液是一种极好的检测介质，可通过无创检测手段监测健康状况及疾病发生、发展和治疗效果。因此，人类唾液具有巨大的潜在诊断价值，不仅可用于口腔疾病的诊断，而且可用于系统疾病的诊断。目前，唾液蛋白质组学技术已成为唾液研究领域的前沿，为唾液诊断价值的研究提供了新的技术平台，它可对唾液蛋白同时进行多变量的研究和分析，利于疾病特异性生物标记物(salivary biomarker)的发现，从而提高疾病诊断的敏感性和特异性，使疾病得以早期发现及早期治疗。
双向电泳—质谱(2—DE—MS)技术是唾液蛋白质组学最常用的研究手段，但由于受上样量的限制，唾液双向电泳结果中，高丰度蛋白的出现常常使唾液低丰度蛋白不能更好的显现，而一些有意义的唾液蛋白生物标记物常常是以低丰度的形式存在于唾液中。为了获得更好的蛋白分离，有必要去除部分唾液中的高丰度蛋白，而使低丰度蛋白富集及显现。
自1975年，英国Kohler和Milstein创立了具有划时代意义的单克隆抗体技术以来，该技术被广泛用于临床诊断、治疗及研究领域中。用单克隆抗体从复杂抗原中分离特定抗原，不仅有利于未知抗原的识别鉴定，而且有利于己知抗原的去除，使复杂抗原成份变得简单，易于分析。用单克隆抗体去除高丰度蛋白技术，在血液蛋白质组学研究中较为成熟，但在唾液蛋白质组学研究中较少，有待进一步深入。
研究目的：制备人腮腺液高丰度蛋白单克隆抗体并进行鉴定，为日后唾液蛋白质组学研究中去除腮腺液高丰度蛋白奠定基础。
研究方法：将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后，进行SDS-PAGE分析，切取分子量约为50—65kDa的高丰度蛋白条带，研磨后注射BALB/c小鼠诱导产生免疫应答，采用经典杂交瘤技术制备单克隆抗体，并应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白免疫印记(Western blot)等方法进行抗体鉴定。
研究结果：共制备11株抗腮腺液高丰度蛋白杂交瘤细胞株，蛋白免疫印记试验表明所制备抗体为特异性抗腮腺液高丰度蛋白抗体。通过ELISA法及Western blot法验证，我们制备出了人腮腺液中丰度最高的蛋白——唾液淀粉酶的单克隆抗体。
结论：成功制备和鉴定了抗人腮腺液高丰度蛋白抗体，为下一步抗体应用研究——去除腮腺液中高丰度蛋白，使低丰度蛋白更好地富集和显露，来发现人腮腺液蛋白组中疾病相关的生物标记物奠定基础。
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