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实验目的：探讨高脂膳食诱导的肥胖大鼠睾丸组织生精细胞凋亡与炎症因子CRP、MCP-1的关系,并研究有氧运动对雄性高脂膳食大鼠生精细胞凋亡与炎症反应的干预作用。实验方法：将雄性健康SD大鼠随机分为4组：普通膳食对照组(C)、高脂膳食组(HF)、普通膳食+运动组(CE)、高脂膳食+运动组(HE),每组各12只,共48只；C组和CE组大鼠,普通饲料喂养：HF组和HE组大鼠,高脂、高热量饲料喂养。实验结束后,各组大鼠数量为：C组8只,HF组11只,CE组10只,HE组11只。CE组及HE组大鼠进行10周60min无负重游泳运动,每周6天。实验结束后检测各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)；测量大鼠体重、体长及睾周脂肪、肾周脂肪重量,计算Lee’s指数及脂体比；酶联免疫吸附法(ELISA)及蛋白印记法(Western Blot)测定C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)水平；免疫组化法检测睾丸组织中CRP、MCP-1表达位置：RT-PCR测定大鼠睾丸及睾周脂中CRP、MCP-1的表达量；原位缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况；HE染色观察睾丸组织形态学的变化。实验结果：1.实验10周后,与C组相比,CE组大鼠体重呈极显著降低,Lee’s指数、TG显著降低,HDL极显著升高,睾周脂、脂体比、TC、LDL无显著性差异。HF组与C组相比,体重、睾周脂、脂体比、Lee’s指数、LDL、TC均呈极显著升高,TG、HDL均无明显差异。与HF组相比,HE组大鼠体重、睾周脂、Lee’s、脂体比、LDL均极显著降低,TC、TG呈显著降低,HDL无显著性差异。2.HE染色结果：C组大鼠生精小管内各级生精细胞发育正常,排列紧密,细胞结构清晰,管腔内可见大量成熟精子,同时可以明显地看到生精小管之间的睾丸间质细胞；HF组生精小管管壁变薄,各级生精细胞排列混乱,细胞层数和成熟精子数量明显减少,可见细胞脱落现象,生精小管基膜不完整,间质细胞明显减少；CE组大鼠生精小管基本正常,各级生精细胞排列基本有序,细胞间隙增大；HE组各级生精细胞发育基本正常,偶见细胞脱落现象,生精小管间间质组织疏松分布。3.与C组相比,HF组大鼠血清中CRP水平极显著升高,MCP-1水平显著升高,CE组大鼠血清CRP、MCP-1无明显差异。HE组与HF组相比,CRP、MCP-1水平均呈显著降低。分析可知,高脂膳食可引起大鼠血清中CRP与MCP-1水平增加,而有氧运动能够降低血清CRP及MCP-1水平。4.与C组相比,HF组睾周脂中CRPmRNA水平极显著升高,MCP-1mRNA水平显著升高,CE组大鼠睾周脂中CRP、MCP-1mRNA水平有所上升,但无显著性差异。HE组与HF组相比,CRPmRNA水平极显著降低,MCP-1mRNA水平显著降低。由此可知,高脂膳食使大鼠睾周脂中CRP、MCP-1mRNA水平升高,引起睾周脂炎症反应,而有氧运动可适当降低CRP、MCP-1mRNA水平,减轻炎症状态。5.与C组相比,HF组睾丸组织CRP、MCP-1mRNA水平极显著升高,CE组大鼠睾丸组织CRP、MCP-1mRNA无显著性差异。HE组与HF组相比,CRP、MCP-1mRNA水平极显著降低。高脂膳食使大鼠睾丸组织中CRP、MCP-1mRNA水平升高,引起睾丸炎症反应,而有氧运动能够降低CRP、MCP-1 mRNA水平,减缓炎症反应。6.蛋白印记法测定蛋白表达结果：HF组与C组相比,CRP、MCP-1蛋白表达水平极显著升高；CE组与C组相比,CRP、MCP-1蛋白表达水平无显著性差异。HE组与HF组相比,CRP、MCP-1蛋白表达水平显著降低,高脂膳食引发的睾丸炎性状态,通过运动能够改善。7.免疫组化结果：在C组大鼠睾丸组织中未见CRP、MCP-1有表达；高脂膳食HF组，发现CRP在睾丸间质细胞有表达,而MCP-1在睾丸间质细胞和支持细胞都有部分表达；CE组及HE组大鼠睾丸组织中较低水平的CRP表达,HE组也可见少量MCP-1的表达,而CE组未发现有MCP-1表达。大鼠有氧运动后可降低CRP、MCP-1的表达水平。8.大鼠睾丸组织中凋亡细胞情况：与C组相比,CE组睾丸组织中生精细胞凋亡率有所升高,但无明显差异,HF组和HE组睾丸组织中生殖细胞凋亡率极显著升高。HE组与HF组相比,睾丸组织中生殖细胞凋亡率极显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食可能引起睾丸组织的炎症反应,从而导致睾丸组织中生殖细胞凋亡增加,而有氧运动可以缓解这一情况。结论：1.高脂膳食能够引发SD雄性大鼠脂代谢紊乱,通过氧运动能改善这一情况。2.高脂膳食喂养可使SD雄性大鼠睾丸组织结构发生变化,并且使得生精细胞凋亡明显增多,而有氧运动能使这一情况得到改善。3.高脂膳食喂养的大鼠生精细胞凋亡和CRP、MCP-1表达具有相关性,而有氧运动的大鼠其CRP、MCP-1的表达及精子凋亡率也有所降低,提示机体可能在高脂膳食诱导炎症时引发睾丸生精细胞凋亡,有氧运动通过降低炎症因子CRP、MCP-1表达干预肥胖大鼠睾丸的生精凋亡。