水稻基腐病菌毒素突变体生物学性状及毒素致病作用

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:icewangb
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本论文通过化学诱变剂方法筛选不产生毒素的突变体,比较毒素突变体与野生菌的有关生物学性状及其对水稻的侵染,并对毒素引起植物的坏死作用进行了研究。主要结果如下: (1)以吖啶橙作为诱变剂,获得了不产生毒素的突变菌株Ech7.3.4 2。 (2)Ech7-3·4 2和3个Tn5毒素突变体的果胶裂解酶、蛋白酶和果胶甲基酯酶的活性均低于野生菌,其中Tn5突变体Ep87胞外酶活性下降更显著(p<0.05)。突变体和野生菌均未检测到纤维素酶和淀粉酶。 (3)通过注射接种烟草和水稻的结果表明,Ech7.3-4 2和Ep87均不引起烟草过敏性坏死(necrotic hypersensitive reaction,HR),也不侵染水稻。其它2个Tn5突变体Ep23和Ep5可引起烟草HR和使水稻致病,但致病力与野生菌相比有所减弱。进一步研究表明,毒素突变体和野生菌株在胞外多糖、脂多糖的产率和群体感应等方面,均不同程度地比野生菌减少,其q~Ep87差异更明显。 (4)通过TLC和毛细管电泳分析,野生菌Ech7和突变体Ech7.3-4 2 EPS均由鼠李糖(Rha)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)组成。 (5)分别用野生菌和突变体处理水稻种子和幼苗, Ech7处理后的水稻呼吸强度高于毒素突变体Ech7-3-4 2,说明水稻种子和水稻苗对致病菌的侵染反应能力更强。 (6)通过菌悬液浸根接种水稻幼苗,2周后接种野生菌的水稻表现症状,植株生长受到抑制,而接种Ech7-3-4 2和Ep87突变体水稻则与之相反。常规PCR方法均能在水稻的茎基部和1-2cm茎部位检测到野生菌和突变体,但在叶片和根检测不到;半定量PCR结果发现,水稻植株体内野生菌的细菌数量明显高于突变体。说明,毒素突变体能在水稻体内定殖,但不引起水稻发病,表明毒素在病菌致病性中作用重要。 (7)毒素能使植物细胞膜透性增加,叶绿体破坏。
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