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复发与转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因。越来越多的研究表明，肿瘤干细胞与肿瘤的发生、转移、多药耐药密切相关，可以说是肿瘤复发、转移的根源所在。本实验室的前期研究及其它实验室的相关报道都已证实肝癌干细胞的存在，但以往研究多局限于肝癌发生方面，对肝癌干细胞复发、转移方面的研究报道较少。本研究着重对肝癌干细胞的转移特性进行探讨。 本论文分两个部分:第一部分，以人肝癌细胞系SMMC-7721为实验材料，以CD133作为肝癌干细胞的表面标志，采用磁式细胞分选的方法获得CD133+和CD133-两个细胞亚群。体外研究了两群细胞的生长、克隆形成、软琼脂克隆形成等体外增殖潜能和细胞-基质粘附、运动、迁移、侵袭等体外转移潜能。体内水平上，建立肝卵圆细胞增殖动物模型和原位移植瘤动物模型，用其观察肝癌干细胞的体内转移特性。通过基因芯片筛选CD133+细胞和CD133-细胞差异表达基因，并进行转移相关分子机制的研究。结果表明:与CD133-肝癌细胞相比，CD133+肝癌细胞在体外具有较快的增殖能力、更高的细胞-基质粘附能力、更强的侵袭与转移能力。体内转移动物模型试验证实人CD133+肝癌细胞能够在免疫缺陷小鼠体内形成自发性和实验性转移，具有较强的体内转移能力。通过基因芯片分析获得了454条差异表达基因，并对涉及肿瘤细胞黏附、迁移、骨架、趋化及转移等相关的信号转导通路及基因进行了生物信息学分析，获得了肝癌转移相关的候选基因，为进一步阐明肝癌干细胞在肝癌转移中的分子机制提供了重要线索。 第二部分，采用人原发性肝癌新鲜手术标本建立人肝癌动物模型及相应的细胞株，并对细胞株的体外增殖、迁移、侵袭等肿瘤干细胞的“干性”特征进行了研究。结果表明，我们成功建立了拥有自主知识产权的人肝癌实验动物模型及人肝癌传代细胞系，它们在体外具有较强的迁移和侵袭潜能，表明它们具有一定的“干性”特征。该动物模型和细胞系的成功建立为肝癌的基础研究及临床诊断、治疗及抗肿瘤药物的筛选等研究提供了理想的实验材料，为进一步的肝癌干细胞的转移机制研究奠定了坚实基础。