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目的：采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学等分子生物学技术，检测在Ca2+鏊合剂BAPTA-AM作用下人肺腺癌细胞SPCA1糖调节蛋白78(GRP78)的表达水平，并分析GRP78表达下调对肺腺癌细胞对VP-16耐药的影响。
方法：将一定密度、生长状态良好的SPCA1细胞随机分为抑制组(加入BAPTA-AM，浓度为0、10、20、30、40、50μM)、诱导组(加入A23187，浓度为2μM)及对照组(加入PBS)。采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学方法检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。再向各组细胞中加入化疗药物VP-16(浓度为30μM)，利用流式细胞仪测定细胞生存率。根据GRP78的表达水平与细胞对VP-16的生存率，分析GRP78在肺腺癌细胞对VP-16耐药中的作用。
结果：BAPTA-AM可抑制人肺腺癌细胞SPCA1 GRP78的表达，且GRP78表达水平与BAPTA-AM具有一定的浓度依赖性。抑制组的荧光强度明显弱与诱导组和对照组。A23187在基因和蛋白水平均能诱导GRP78的表达。流式细胞仪检测细胞凋亡率结果显示：抑制组细胞凋亡率高于对照组和诱导组，而诱导组细胞凋亡率最低。
结论：本实验研究结果表明：BAPTA-AM能够抑制人肺腺癌细胞SPCA1核酸和蛋白水平GRP78的表达，而A23187能够诱导GRP78表达。GRP78表达程度与VP-16作用下细胞的凋亡率具有相关性，GRP78表达越高，细胞生存率越高。这表明GRP78能够提高SPCA1细胞对VP-16的耐药性，且其耐药性与GRP78表达的程度有关。在基因水平干预GRP78的表达，一方面能够减弱GRP78对肿瘤细胞的保护作用，另一方面能够减低肿瘤细胞对化疗药物的耐药，促进肿瘤细胞的凋亡，提高化疗药物疗效，这一手段可能成为未来治疗肺癌的新办法。