基于四苯乙烯ATP荧光探针的合成、性质及应用研究

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三磷酸腺苷(ATP)在细胞生命活动中扮演着重要角色,细胞内ATP成像对于细胞生物学的研究具有重要意义。传统的ATP检测方法大多仅能应用于对细胞提取液中ATP的检测,难以实现对活细胞中ATP的实时动态监测。基于分子成像技术的ATP荧光探针具有灵敏度高、响应时间短、选择性强、用样量少、可实时成像等优点而广受关注。目前,对ATP的原位检测仍是一个难题,已经报道的ATP荧光探针在选择性和生物相容性方面仍旧存在一定的缺陷。因此发展起来一种选择性强、生物相容性好的ATP荧光探针对于分子细胞生物学的研究和发展极其重要。此外,传统的荧光染料普遍存在高浓度聚集导致荧光淬灭的现象,这种荧光淬灭的现象会在一定程度上对检测的精确度造成影响。具有聚集诱导发光性质(AIE)的荧光染料是指在单分散状态下无荧光发射,而聚集时发射出强荧光的一类荧光分子,该类分子优异的光学性能有效地克服了传统荧光材料聚集淬灭(ACQ)现象带来的干扰,为新的荧光传感器的设计和制备提供了更多的可能性。  基于四苯乙烯化合物优良的聚集诱导发光特性,本论文合成了一种水溶性四苯乙烯衍生物,研究了它的基本光物理性质和荧光响应机理,并将此化合物应用到了细胞内的ATP识别过程中。具体内容包括:  1、设计并合成了一种水溶性四苯乙烯化合物TPE-IMI-EG,在不同溶剂中对化合物的光物理性质进行了测试,验证了化合物的聚集诱导发光性质,对化合物的AIE产生机理进行了研究,证实了分子内运动受限是化合物产生AIE性质的主要原因。此外,考察了化合物在不同种类的非离子表面活性剂中的发光性能。  2、以水溶性四苯乙烯化合物TPE-IMI-EG作为ATP荧光探针,研究了化合物在细胞内外对ATP的识别过程,该化合物不仅表现出对ATP的特异性识别能力,而且具有很好的生物相容性;利用荧光显微成像技术对ATP在细胞内的分布进行了研究,实现了对细胞内ATP的检测。
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