【摘 要】
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目前水稻的转化体系已经成功地建立，但仍局限在少数几个品系，且还有很多需要改进的地方。随着水稻功能基因组研究的深入，越来越多的新基因被分离，而且研究对象也不仅局限在少数几
【出 处】
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中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源中心 中国科学院遗传与发育生物学研究所
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目前水稻的转化体系已经成功地建立，但仍局限在少数几个品系，且还有很多需要改进的地方。随着水稻功能基因组研究的深入，越来越多的新基因被分离，而且研究对象也不仅局限在少数几个品种。因此必须加强其他水稻材料的转化研究。本论文选择脆性水稻材料为转化对象，采用水稻幼胚、成熟胚为受体，主要利用农杆菌介导的转化法，通过优化各方面的参数，建立该基因的稳定遗传转化体系，并将一个水稻脆秆控制新基因导入其中，验证基因的功能。为了确定脆性材料愈伤组织培养的最佳条件，我们针对不同的培养基、添加物以及培养条件分别做了系统的试验，试验结果表明，愈伤组织基本培养基培养以NB为好，培养过程添加脯氨酸和谷氨酰胺400-500mg/L。共培养过程中农杆菌农杆菌OD600值在0.6-0.8之间，侵染后在22-24。C温度下暗培养3天。共培养后的愈伤组织接种到加有头孢霉素500mg/L和潮霉素40mg/L的筛选培养基上进行筛选培养。进行两轮筛选培养后，挑选抗性愈伤组织接到添加ABA的预分化培养基上，幼胚的预培养时间在8-16天，成熟胚的最佳预培养时间为12-16天。之后接到分化培养基上，分化期间最适合水稻分化的激素浓度为6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L，分化率最高。10-15天有分化绿点，随后长出分化苗。对再生苗进行PCR检测后进行移栽，并进行了初步的功能检测。脆性材料在细胞壁加厚上是缺陷的，这可能是导致植株机械强度降低的最主要原因。
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