碱茅Put-R40g3基因在逆境胁迫下的功能解析

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当前,盐碱地面积的不断扩大对农牧业生产和农业经济的繁荣都产生了严重的影响,因此对盐碱地资源的开发和利用有着极其重要的现实意义。本论文以这一现状为研究背景,采用碱茅(Puccinellia tenuiflora)作为试验材料,从碱茅cDNA文库中分离得到Put-R40g3基因(登录号:AB465547)。克隆的cDNA全长为869bp,其编码的蛋白质共有195个氨基酸,与水稻、小麦和拟南芥的R40g3蛋白的氨基酸序列有较高的同源性。对经逆境处理的碱茅幼苗根、叶中该基因的表达分析结果表明,碱茅中Put-R40g3基因的表达有被ABA、盐(NaCl、Na2CO3、NaHCO3)和干旱诱导的趋势。这个结果预示了Put-R40g3基因与逆境存在密切关系利用与植物有类似代谢途径的单细胞真核生物--酵母作为模型来研究Put-R40g3蛋白在细胞内的位置及其在真核细胞中表达时所呈现出来的抗逆性。Put-R40g3蛋白与绿色荧光蛋白(GFP)融合在酵母细胞表达的蛋白质定位研究结果表明了Put-R40g3蛋白存在于细胞质中。同时Put-R40g3基因在酵母中表达,使酵母在盐(NaCl、Na2CO3、NaHCO3)、干旱及氧化逆境条件下提高了对逆境的适应能力。在转基因拟南芥中,对获得的能够稳定表达Put-R40g3基因的转基因株系进行盐和干旱胁迫,结果显示转基因株系在逆境下的生根情况要优于野生型拟南芥。此外,转基因株系生长发育的形态有异于野生型,会在茎部或底部生长出一个或多个柄。这个结果预示Put-R40g3是一个与植物发育相关的蛋白。综上所述,本研究只是对Put-R40g3基因的特性进行了初步的解析,对于Put-R40g3蛋白在细胞内的生化功能和其性质以及该蛋白在抗逆机理中所发挥的作用还有待于进一步的研究。
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