乳中三聚氰胺高效薄层色谱检测方法初步研究建立

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:kevinsnower
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国家推荐的三种乳品三聚氰胺(Melamine, MA)仪器检测方法存在仪器昂贵、实验室条件和操作员素质要求高、耗材和设备维护费用高及操作复杂费时等缺点。研究建立一种成本低廉、操作简便、检测效率高的检测方法十分必要。本研究基于一个“浓缩展开”的创新思维和设计,克服薄层色谱检测MA灵敏度不足的缺点,建立乳中MA污染的高效薄层色谱(High performance Thin layer chromatography,HPTLC)分析方法。预实验中对薄层板、显色、前处理和展开剂等进行选择和优化。确定采用高效硅胶G薄层板、氯气-淀粉/碘化钾显色和加浓盐酸离心脱脂除酪的方法。发现展开中样品扩散使MA斑点显色色度降低是薄层色谱检测MA灵敏度不足的根本原因。由此提出了在薄层板上对MA进行浓缩展开的创新思维设计,重点研究开发“浓缩展开剂”,显著提高了HPTLC对MA的检测灵敏度,初步建立了牛乳中MA的HPTLC定性和定量检测方法。正交优化浓缩展开剂配方为四氢呋喃:冰醋酸: T试剂(9.5:0.22:0.06),可显著浓缩MA,斑点呈椭圆形或弦月/月牙形,检出限达到了1.0mg/L~0.5 mg/L,达到了高效液相色谱法检测MA的水平。展开剂对MA特异,乳成份和MA类似物均无干扰;操作可在30min~40min完成;每块100×100mm薄层板可点9个样品,批量处理方便;单样检测成本不超1.0元。MA最大吸收波长为400nm;HPTLC定量分析MA标准曲线可定量范围较大(0.5mg/L~80mg/L),三个薄层板标准曲线相关系数r~2均达0.999;可根据检测范围选用曲线回归或直线回归。仪器化、标准化操作可提高检测结果的稳定性。同板RSD为3.35%,异板RSD为12.76%。本方法可进行ppm级MA的定性和初步定量检测。
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