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2型糖尿病(Type2Diabetes mellitus,T2DM)是一种严重危害人类健康的内分泌代谢疾病。其中,空腹血糖受损(impaired fasting glucose,IFG)和糖耐量受损(impaired glucose tolerance,IGT)是正常糖耐量到T2DM的中间代谢阶段。随着人们生活水平的提高、膳食模式的改变、人口老龄化以及肥胖发生率的增加,T2DM的患病率呈现逐年增高趋势,据世界卫生组织估计,到2030年全球将有3.66亿人患有糖尿病,且会有大量IFG/IGT的流行。氧化应激和内质网应激在糖尿病的发生中起到重要的作用。硒是人体内重要的必需微量元素之一,它的主要功能由25种硒蛋白发挥,其中一些具有抗氧化以及调节内质网应激的功能。因此,硒元素可能通过这两种途径来影响T2DM的发生。然而研究硒与T2DM关联的动物以及人群流行病学的结果均存在较大差异。在25种硒蛋白中,硒蛋白P(selenoproteinP,SEPP)的主要作用是将肝脏产生的硒运送到身体各部分。位于SEPP基因3’非翻译区的单核苷酸多态性位点(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)rs7579 可以影响该蛋白全长亚型的表达,全长亚型有更强的运输硒的能力,从而影响有代表性的硒的生物标志物的浓度和活性,进而影响疾病的患病情况。因此,本研究的目的是探究血浆硒水平、SEPP rs7579基因多态性以及两者交互作用与T2DM的关联。主要研究内容如下:第一部分血浆硒浓度与2型糖尿病的关联性研究第一节血浆硒浓度与2型糖尿病的关联性研究目的:研究血浆硒浓度与T2DM的关联关系。结论:硒蛋白浓度过高或者过低都可能导致T2DM的患病风险增加。第三节氧化应激与T2DM以及血浆硒浓度的相关性研究目的:探究氧化应激与T2DM以及血浆硒浓度的相关性。方法:采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)比色法检测血浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)。结果:(1)T2DM 组与 NGT 组相比,T2DM 患者血浆 MDA 和(T2DM6.52±0.18 nmol/Lvs.NGT5.79±0.12nmol/L;P=0.001)。(2)将(79.63-90.31,<90.32-99.80,99.81-112.67μg/L)归类为一个区间79.62-112.67μg/L。79.62-112.67 和>112.67 μg/L 血浆硒区间的 MDA 值显著低于<79.62 μg/L 血浆硒区间(79.62-112.67 μg/L 5.81 ±3.24nmol/L vs.<79.62 μg/L 6.27±2.95 nmol/L,P<0.001;>112.67 μg/L 5.89±2.93 vs.<79.62 μg/L 6.27±2.95 nmol/L,P=0.018)。结论:脂质过氧化程度的增加与T2DM有很强的关联性;血浆硒浓度降低可能与机体脂质过氧化水平升高相关。第二部分硒蛋白P rs7579基因多态性与2型糖尿病风险的关联性目的:探讨SEPP rs7579基因多态性以及该SNP和血浆硒浓度的交互作用与T2DM的关联性。方法:使用TaqMan探针进行基因分型;采用western blot检测SEPP亚型的表达水平。结果:(1)总体来说,GG和GA基因型携带者相对于AA基因型携带者T2DM的患病风险分别为0.90(0.65,1.24)和0.80(0.58,1.12)。将血浆硒浓度分为5分位后,在最低分位,GG和GA基因型携带者相对于AA基因型携带者T2DM的患病风险分别为 0.49(0.24,0.98)和 0.44(0.22,0.90)。方法:采用GOD-POD法测空腹血糖(Fasting blood glucose,FPG),采用电化学发光免疫分析方法(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)测空腹胰岛素(fasting plasma insulin,FPI),利用稳态模式(homeostasis model assessment,HOMA)评估法评估HOMA-IR和HOMA-β。采用电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测量血浆硒浓度。结果:本次研究总共检测5392名受试者,T2DM患者2630例和正常糖耐量(normal glucose tolerance,NGT)受试者 2762 例。(1)T2DM组与NGT组相比,T2DM患者血浆HOMA-IR值是显著增高的(T2DM4.26±0.13vs.NGT2.17±0.11;P<0.001),而HOMA-β值是显著下降的(T2DM44.40±1.78vs.NGT 103.37±5.01;P<0.001)。(2)T2DM患者和NGT受试者的平均血浆硒浓度分别为98.01±25.37、96.72±21.05μg/L。经多变量调整后两边的五分位数硒区间(<79.62,79.63-90.31,99.81-112.67,>112.68 μg/L)相对于中间的五分位数硒区间(<90.32-99.80μg/L)T2DM 患病风险的 OR 值分别为 1.68(1.35,2.08),1.01(0.82,1.24),1.15(0.93,1.41)和 1.86(1.51,2.29)。(3)在五分位数硒浓度较低的三个分位,血浆硒浓度每升高5 μg/L,T2DM的OR值为0.81(0.78-0.85);在五分位数硒浓度较高的三个分位,血浆硒浓度每升高 5 μg/L,T2DM 的 OR 值为 1.21(1.18-1.25)。结论:微量元素硒与T2DM呈现出U型的关联,硒水平过高或者过低都可能导致T2DM的风险的增加。第二节血浆硒蛋白P与T2DM的关联性研究目的:探寻血浆硒蛋白P(selenoprotein P,SEPP)浓度与T2DM的关联性。方法:采用ELISA测定血浆SEPP浓度。结果:本次研究总共检测1293名被试者,T2DM患者610例和NGT受试者683例。经多变量调整后两个较高的三分位数硒蛋白区间(4.8～5.96,>5.96 mg/L)相对最低血浆硒蛋白浓度区间(<4.8mg/L)患T2DM的风险分别为0.83(0.66,1.10),1.31(1.00,1.68)。(2)在三个低的五分位数硒浓度,血浆硒浓度每增高5μg/L,GG,GA,AA基因型携带者T2DM的患病风险分别为0.94(0.90,0.98),0.93(0.91,0.99)和0.75(0.58,0.98)。(3)在最低的五分位数硒浓度,对照组中,AA基因型携带者全长亚型的比例低于GA/GG基因型携带者(P=0.046),而在T2DM组中,不同基因型携带者的全长亚型的比例无显著性差异。结论:在硒浓度过低时,SEPPrs7579 AA基因型携带者较其它基因型患T2DM的风险高,且可能与全长亚型较少,SEPP的运输能力下降相关。