【摘 要】
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丙型肝炎病毒(HCV)是引发肝癌的重要因素之一,据统计,目前全球共有1.7亿丙型肝炎患者,相对于乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒更容易引发肝脏疾病,是危害人类健康的重要病毒。到目
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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丙型肝炎病毒(HCV)是引发肝癌的重要因素之一,据统计,目前全球共有1.7亿丙型肝炎患者,相对于乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒更容易引发肝脏疾病,是危害人类健康的重要病毒。到目前为止,能够治疗丙型肝炎的药物有限,且容易出现耐药性,最糟糕的是,目前还没有丙型肝炎病毒疫苗问世。
与其它病毒一样,HCV病毒需要依赖于宿主因子完成进入,脱壳,复制,组装以及释放,在细胞内有大量的宿主蛋白参与这个工作,研究清楚这些蛋白的成分以及它们所扮演的角色将会至关重要,这也将会为药物研发提供新的靶点。本实验室前期已经采用基因芯片的办法检测了HCV病毒感染肝癌细胞后宿主细胞因子mRNA的变化情况,在此基础上,对九个基因进行了验证,最后选择了两个基因(PRNP以及TTL)进行了RNA干扰试验,结果显示这两个基因被干扰后对病毒复制没有明显影响。
JFH-1病毒株的出现使科研人员第一次获得了真正意义上的HCV体外细胞培养系统,同时我们实验室之前已经成功构建了在NS5A的399位插入EGFP的病毒株,在发生多个点的适应性突变后能够产生比较高滴度的病毒,其中两个关键突变位点为NS3的M260K以及NS5A的T462I,但同时我们发现在NS5A的399位插入EGFP本身对病毒有一定影响。本实验是在JFH-1病毒的一个新的位点(NS5A的418位)插入EGFP,同时引入能够增强病毒组装能力的两个点突变(NS3的M260K以及NS5A的T462I)。实验结果初步表明,这两个关键性点突变的确有助于病毒的组装。另外,J418E,在没有点突变的情况下,病毒的复制状态很好,是一个适合于研究HCV病毒的平台。
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