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目的：PV、ET、IMF组成了经典的BCR/ABL阴性的MPD。与CML不同，在PV、ET和IMF患者中没有发现可重复性染色体易位，也无特效治疗药物。近来，国外有5个研究组分别发现了同一个有可能引起BCR/ABL阴性的MPD的分子异常，即大多数PV(65％～97％)、部分ET(23％～57％)及IMF(35％～57％)患者中存在高致病性的获得性基因突变一JAK2val617phe(或称JAK2V617F)点突变，即在JAK2基因的第1849位密码子由 G 变成T后，JAK2激酶的617处缬氨酸被苯丙氨酸代替(JAK2 V617F)，这是一种激活性突变，此突变在其他血液系统疾病中罕见。该突变的发现对研究BCR/ABL阴性MPD的分子发病机制是一个重要的突破。然而，目前国内关于JAK2 V617F与BCR/ABL阴性MPD的关系，以及细胞因子信号转导负反馈抑制因子SOCS3基因的表达水平对BCR/ABL阴性MPD疾病发展的影响等研究尚是一项空白。本研究旨在检测JAK2基因的第617位点在PV、ET、IMF患者和CML、急性白血病以及健康个体的突变情况和SOCS3 mRNA的表达情况。探讨JAK2V617F突变和SOCS3mRNA表达水平与BCR/ABL阴性的骨髓增殖性疾病的关系，进一步揭示这组疾病的分子生物学发病机制，为开发相应的靶向治疗药物提供理论依据。
方法：
1.选择PV26例、ET26例、IMF9例、慢性中性粒细胞性白血病(CNL)1例为研究组，CML20例、急性白血病10例、健康志愿者15位为对照组。所有入组病例均符合2000年WHO相应诊断标准。并排除了继发性红细胞增多症、继发性血小板增多症、继发性骨髓纤维化。
2.观察各组患者的临床特征，包括年龄、性别、临床症状体征、血象改变、骨髓象及骨髓病理特点、对常规治疗的反应及转归等情况。
3.分别从各组患者和正常人的周围血或骨髓标本的单个核细胞中提取RNA和DNA。
4.利用已提取的RNA，用RT-PCR方法检测各组SOCS3mRNA及bcr/abl mRNA的表达情况，确定bcr/abl融合基因阴性的MPD患者的数量。
5.利用已提取的DNA，用等位基因特异性聚合酶链反应方法(AS-PCR)检测各组患者JAK2基因JH2区(第12外显子)V617F的突变情况，将bcr/abl融合基因阴性的MPD患者分为JAK2V617F突变阳性组及突变阴性组。
6.分析bcr/abl融合基因阴性的MPD患者的JAK2V617F的发生率及JAK2V617F点突变阳性组及阴性组之间SOCS3mRNA表达的相关性，及JAK2V617F的阳性组与阴性组患者临床特征的差异。
结论:
1.绝大多数bcr/abl融合基因阴性的MPD患者中存在着同一种分子异常-JAK2V617F点突变，其发生率在 PV 为88％、ET为58％、IMF为56％，而在其他血液系统疾病如CML、AL 及正常人群中不存在，与国外文献报道相似。这一突变对于研究bcr/abl融合基因阴性的MPD的分子发病机制是一个重要的突破。
2.bcr/abl融合基因阴性的MPD患者中JAK2V617F点突变阳性与阴性组SOCS3 mRNA的表达率及表达水平均有显著性差异。两组患者间年龄、性别无明显差异，血象方面，PV中的血红蛋白、ET中的血小板均无显著性差异。但JAK2突变阳性ET较阴性ET相比出血、血栓、转白等并发症发生率高。