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目的:翼状胬肉是我国常见的眼表可致盲眼病之一,发病率较高。由于其发病机制不清,加之其向角膜中央呈浸润性生长,单纯手术切除不易切净,容易复发,预后较差,故深入研究其发病机制对指导临床治疗和防盲治盲具有十分重要的意义。近年来的分子生物学研究表明,翼状胬肉属于组织增生性疾病,可能与细胞的增殖和凋亡相关。Ki-67是存在于增殖细胞核基质内的与细胞有丝分裂及增殖密切相关的蛋白抗原,其表达除G0期及G1早期外其他细胞周期均有表达,在有丝分裂期达到高峰,半衰期为1h甚至更短,分裂后即迅速降解,对维持DNA结构的完整性有着重要作用,是一个能反映细胞增殖的敏感性指标。增殖细胞核抗原(Proliferating cell nucler anti-gen,PCNA)是存在于细胞核内的DNA聚合酶δ的辅助蛋白,其直接参与细胞的增殖,静止期细胞内其含量很少,G1晚期开始增加,S期达高峰,G2期开始下降,M期检测不到,是真核细胞DNA合成所必须的核蛋白,在DNA复制过程中起着重要的调节作用。被许多学者认为是一种能准确、简便并直观观察细胞增殖状态的指标。近年来,虽然有一些关于Ki-67和PCNA与肿瘤发生发展关系的实验研究,但有关Ki-67及PCNA在翼状胬肉组织中表达的临床病理意义及相关性的研究报道较为少见。本实验旨在通过对翼状胬肉组织中Ki-67和PCNA表达的检测,探讨Ki-67和PCNA在翼状胬肉中的表达与性别、年龄、病程、工作环境、临床分期等临床病理特征间的关系,同时对二者的相关性进行分析。以期为临床治疗及预防翼状胬肉提供科学的理论依据。 方法:收集正常结膜组织标本20例,翼状胬肉组织头部及体部标本53例,采用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)SP法检测正常结膜组织和翼状胬肉头部与体部组织中Ki-67和PCNA的表达。应用SPSS16.0统计软件进行统计学分析,以α=0.05为检验标准,当P<0.05时差异有统计学意义。计数资料计算阳性率,样本率之间的比较采用X2检验,两变量之间相关性检验采用Spearman等级相关分析。 结果:⑴Ki-67在翼状胬肉头部组织中阳性表达率为81.13%(43/53),明显高于正常结膜组织阳性表达率25%(5/20),二者差异有显著性(P<0.05)。Ki-67在体部中的阳性表达率为22.64%,与正常结膜组织的阳性表达率25%比较,无显著性差异。Ki-67在体部中的表达与患者的性别、年龄、眼别、病程、工作环境、临床分期等均无明显相关性(P>0.05)。Ki-67在翼状胬肉头部中的表达虽然也与患者的性别、年龄、眼别、病程、工作环境等均无明显相关性(P>0.05),但与患者临床分期之间有显著相关性,Ki-67在翼状胬肉组织进展期、复发期中的表达明显高于静止期(P<0.05)。⑵PCNA在翼状胬肉头部组织中的阳性表达率为90.57%(48/53),显著高于正常结膜组织的阳性表达率(15%),二者差异有显著性(P<0.05)。PCNA在体部中的阳性表达率为32.08%,与正常结膜组织的阳性表达率15%比较,无显著性差异。PCNA在翼状胬肉头部及体部组织中的表达与患者的性别、年龄、眼别、病程、工作环境、临床分期等均无明显相关性(P>0.05)。⑶在检测的53例翼状胬肉组织中,经spearman级联相关分析,在翼状胬肉头部Ki-67的阳性表达与PCNA的阳性表达有相关性,二者呈正相关(P<0.05),相关系数为0.300(Table.9、Table.10)。在翼状胬肉体部,二者的阳性表达无相关。 结论:①Ki-67、PCNA在翼状胬肉头部组织中的表达明显高于正常结膜组织,提示Ki-67、PCNA可能与翼状胬肉的发生发展有关。二者在胬肉头部组织的阳性表达呈正相关,但相关强度较弱(r=0.300)。鉴于本实验研究样本数量较少,其真实的关联强度和机制还有待多中心大样本的临床实验研究。②Ki-67在翼状胬肉组织进展期、复发期中的表达明显高于静止期。另外,Ki-67在翼状胬肉头部中的表达明显高于体部,表明Ki-67的表达与翼状胬肉的临床分期明显相关,且细胞增殖主要存在于翼状胬肉头部,提示Ki-67可能与翼状胬肉的浸润发展有关。所以,Ki-67可能为预测翼状胬肉浸润增生提供一个具有实用价值的生物学指标。③PCNA在翼状胬肉静止期、进展期、复发期均呈现高表达,这说明翼状胬肉细胞的增殖可能多处于细胞周期的S期。另外,PCNA在翼状胬肉头部中的表达明显高于体部,表明翼状胬肉的细胞增殖主要存在于头部,提示PCNA可能与翼状胬肉的增生发展有关,有望成为研究翼状胬肉组织细胞增殖活性的实用指标之一。④Ki-67、PCNA的表达与翼状胬肉患者的性别、年龄、眼别、病程均无关。⑤本研究显示Ki-67、PCNA的表达与翼状胬肉患者工作环境的关系无统计学意义,但因样本较少,其与工作环境的具体关系尚待大样本进一步研究。