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荷叶是一种食药两用的天然植物,富含多种生物活性物质,如黄酮类化合物和生物碱类化合物。湖南是荷叶的主要产区之一。本论文对不同生长期荷叶中总黄酮和荷叶碱含量的变化规律、总黄酮和荷叶碱的提取纯化方法进行了研究,得到了以下几个方面的结论:1、采用单因素试验和正交试验,研究了荷叶中总黄酮超声波辅助溶剂提取工艺,并用分光光度计法测定了荷叶中总黄酮的含量。研究结果表明,超声波辅助溶剂提取荷叶中总黄酮的最佳工艺是:料液比为1:35(g/mL),乙醇溶液体积分数为60%,超声功率为175W,提取温度为50℃,提取时间为30min。在此优化工艺下,荷叶总黄酮得率为9.13%。2、比较了四种大孔树脂(AB-8、HP-20、D-101、NKA-9)、聚酰胺树脂和硅胶对荷叶总黄酮的吸附效果和解析效果,确定了AB-8大孔树脂对荷叶中总黄酮有良好的吸附率和较高的解析率,适合荷叶总黄酮的分离纯化。通过AB-8大孔树脂的动态吸附和动态解析试验得到,分离纯化荷叶中总黄酮的最佳工艺为:用浓度为0.8mg/mL的总黄酮提取液上柱,以1.5mL/min的流速动态吸附;然后用70%的乙醇溶液,以1.OmL/min的流速解析,同样的条件下,分离纯化二次,最后得到纯化后的荷叶总黄酮,其纯度为75.16%。3、采用单因素试验和正交试验,研究了荷叶中荷叶碱冷凝回流-溶剂提取工艺,并用分光光度计法测定了荷叶中荷叶碱的含量。研究结果表明,冷凝回流-溶剂提取荷叶中荷叶碱的最佳工艺是:料液比为1:30(g/mL),乙醇溶液的体积分数为80%,提取温度为90℃,提取时间3h。在此优化工艺下,荷叶中荷叶碱的得率为2.135mg/g。4、比较了四种吸附树脂(D101大孔树脂、HPD450大孔树脂、732阳离子交换树脂和聚酰胺树脂)对荷叶中荷叶碱的吸附效果和解析效果,确定了HPD450大孔树脂对荷叶碱有良好的吸附率和较高的解析率,适用于荷叶碱的分离纯化。通过HPD450大孔树脂的动态吸附和动态解析试验得到,分离纯化荷叶中荷叶碱的最佳条件为:用浓度为0.4mg/mL的荷叶碱粗提液上柱,经过1.OmL/min的流速吸附;吸附结束后,再用90%的乙醇,以0.75mL/min的流速解析,最后得到纯化后的荷叶碱产品。产品的纯度为80.34%。5、研究了不同生长期荷叶中总黄酮和荷叶碱含量的变化规律,结果表明:随着荷叶的生长(五月至七月),总黄酮和荷叶碱含量逐渐增加;至成熟期(八月)`时,总黄酮含量达到最高值(94.21mg/g),荷叶碱含量达到最高值(2.152mg/g);当荷叶进入衰亡期(九月至十一月)时,总黄酮和荷叶碱的含量又逐渐下降。通过多重比较发现,八月中旬的荷叶总黄酮含量极显著高于其他月份的荷叶总黄酮含量;而八月中旬、九月中旬、十月中旬和十一月中旬的荷叶之间荷叶碱含量没有显著差异。