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目的:本研究为河南省重大科技攻关计划项目“中药饮片加工炮制规范化研究”的子课题“禹白附饮片加工炮制规范化研究”的后续课题。白附子药材来源限定于河南禹州市主产的天南星科植物独角莲Tyhonium giganteum Engl.干燥块茎。比较白附子生、制品在紫外光谱及HPLC图谱上的区别,分离鉴定白附子炮制后新增成分,建立新增成分的定性定量方法,考察白附子不同炮制工艺对新增成分含量的影响,研究白附子抗肿瘤作用,探讨白附子不同炮制品对酪氨酸酶活性的影响。为优化炮制工艺研究提供科学依据,为利用制白附子抗癌作用开发新的药物以及中医临床用药安全有效提供应用基础。方法:用紫外谱线组法比较白附子生、制品不同溶剂部位紫外图谱峰位和峰值的变化;采用HPLC法比较白附子炮制前后化学成分的变化,确定新增化学成分检测条件;采用不同极性溶剂提取,HPLC检测新增成分存在的溶剂部位,薄层色谱法确定新增化学成分定性条件及分离条件,硅胶柱层析法和制备液相法分离纯化新增化学成分,运用现代波谱分析方法(UV、IR、1HNMR、13CNMR及MS)和理化方法确定单体化合物的结构;采用Molish反应检识白附子生品中的糖苷,HPLC-ELSD法分析白附子炮制前后低聚糖的种类及含量变化,模拟白附子炮制条件进行试验,研究制白附子中新增成分生成途径;采用HPLC法对不同时间及不同白矾用量加热炮制的白附子制品中的新增成分进行了含量测定,考察药典法常压制白附子炮制工艺条件对新增成分含量的影响;考察姜矾辅料的用量、加压时间、加压压力、加压温度等加压炮制工艺条件对新增成分含量的影响;采用HPLC法建立测定白附子中新增成分类似结构化合物含量的方法,考察炮制对该化合物含量的影响;采用体内抗肿瘤实验方法,观察白附子生品、制品水煎剂和醇提物对S180小鼠的抑瘤作用以及对S180小鼠免疫器官的影响;采用酶活性测定法,测定白附子不同炮制品对酪氨酸酶活性的抑制率。结果:白附子炮制后,其紫外谱线组发生显著变化,各提取部位炮制后含量均有明显下降,氯仿及水部位下降与乙醇部位相比更为显著,药典制品和加压制品紫外谱线组相似;白附子炮制后产生了新增化学成分且其含量相对较高;新增化学成分是5-羟甲基糠醛(5-HMF),其结构类似物质是双[5-甲酰基-糠基]-醚;生品中低聚糖类主要有果糖、葡萄糖、蔗糖等,蔗糖在白附子炮制条件下能转化成5-HMF;不同炮制品中5-HMF含量在一定范围内随加热时间的延长而增加,随着辅料白矾用量的增加而增加,加压制白附子中5-HMF含量在一定范围内随加压温度升高而降低,随白矾用量的增加先升高后降低,以9%白矾为最高,不加姜制品大于加姜制品;白附子炮制前后双(5-甲酰基糠基)醚含量生品<加压法制品<药典法制品;白附子抗肿瘤实验,水煎剂:与对照组比较,环磷酰胺组和生品组抑瘤率分别达到52.86%、26.43%,均有显著性差异(P<0.05),制品对胸腺和脾脏的作用强于生品。醇提物:与对照组相比较,生品高剂量组抑瘤率41.24%,具有显著性差异(P<0.05),制品醇提物提高小鼠免疫器官重量,制品醇提物各剂量组对S180腹水瘤小鼠有生命延长作用;白附子不同炮制品对酪氨酸酶抑制率:药典法炮制品<加压炮制品<生品。结论:紫外谱线组法简便,准确灵敏,可用于鉴别白附子生品与制品;白附子炮制后产生了新增化学成分5-羟甲基糠醛(5-HMF),得到的其结构类似物质为双[5-甲酰基-糠基]-醚,两个化合物均为首次从白附子制品中分离得到;炮制品中的5-HMF可能是生品中的蔗糖在炮制过程中转化而成的;白附子药典法不同炮制品中5-HMF含量与加热时间和辅料白矾用量呈正相关;姜矾辅料的用量、加压时间、加压压力、加压温度等加压炮制工艺条件对5-HMF含量均有一定影响,加压炮制能明显提高5-HMF的含量;炮制能提高白附子中的双(5-甲酰基糠基)醚含量;白附子炮制前后水煎剂和醇提物均有一定的抗肿瘤作用,制品水煎剂和醇提物有一定的增强小鼠机体免疫功能作用,白附子生品醇提物无生命延长作用,而制品醇提物延长小鼠生存时间,临床应用宜选用制品;白附子不同炮制品对酪氨酸酶均有一定的抑制作用,炮制对其有一定影响,应用时宜选用加压法制品。