【摘 要】
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该研究分别对胎鼠听囊、新生鼠听觉上皮和成年鼠听觉上皮用自然培养方法进行体外培养,并应用免疫细胞化学方法,对培养细胞进行染色标记和观察,系统了解哺乳动物听觉细胞发生
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该研究分别对胎鼠听囊、新生鼠听觉上皮和成年鼠听觉上皮用自然培养方法进行体外培养,并应用免疫细胞化学方法,对培养细胞进行染色标记和观察,系统了解哺乳动物听觉细胞发生、发育过程,以及这些细胞在体外的增殖和分化过程,旨在了解哺乳动物听觉细胞听觉上皮感觉细胞的来源,发现细胞生长的前体细胞.并探讨了各种生长因子对体外培养的听觉上皮感觉细胞增殖和分化的影响.结论:(1)在体外自然培养条件(用一种改良的细胞培养方法)诱导下,新生鼠和成年鼠耳蜗听觉上皮细胞可以增殖和分化.(2)培养的听觉上皮细胞表达上皮细胞和毛细胞的特征,有不成熟的毛细胞(毛细胞样细胞)出现.在新生鼠和成年鼠的耳蜗内可能存在听觉毛细胞的前体细胞.产生这种未成熟的毛细胞的前体细胞可能是:①支持细胞;②潜在的干细胞.(3)耳蜗上皮细胞的增殖活动和向毛细胞方向的分化受生长因子的调控,其中bFGF有较强的促增殖和促早期分化的作用;TGF-α有一定的促增殖作用,无促分化效应;PDGF-AA和PDGF-BB有微弱的促分化作用,却没有促增殖效应;bFGF和TGF-α协同时,对细胞的促增殖和分化作用均没有得到增强;而bFGF和PDGF协同后,其促增殖效应降低,但促分化的作用增强,而且细胞分化方向也有了一定程度的改变.(4)胎鼠听囊细胞在体外自然培养条件下可以增殖分化为未成熟毛细胞.听囊细胞分化后细胞形态主要有上皮细胞形态、成纤维细胞形态和神经细胞形态.
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