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中华鳖(Pelodiscus sinensis)作为重要的水生爬行动物之一,也是亚洲经济价值较高的特种养殖品种,在中国,普遍认为其具有一定的药用价值。本文的目的是研究中华鳖饲料中脂肪对蛋白质节约作用,植物蛋白部分替代鱼粉的可行性以及不同脂类对中华鳖肝脏ACC和LPL的mRNA表达的影响。研究结果如下: 1.饲料中利用脂肪节约鱼粉和蛋白质对中华鳖生长性能和生理机能的影响 为了研究脂肪对中华鳖饲料中鱼粉和蛋白质的节约作用,选取初重为4.26±0.14g的中华鳖360只,随机分到6个试验组中,每组3个平行,进行为期60天的养殖试验。对照组(CD)为中华鳖的生产日粮,粗蛋白46%,白鱼粉比例为55%,5个等蛋白不同能量的试验组(F,S,L1,L2和L3)粗蛋白为41.3%,白鱼粉比例为45%,F,S,L1为三种不同脂肪源鱼油,豆油和混合油(鱼油∶豆油1∶1),L2和L3为2个混合油的不同脂肪梯度。结果表明:各试验组成活率未见显著差异(p>0.05);5个试验组增重率(WG)和特定生长率(SGR)显著高于CD,L3最高(p<0.05);饲料系数L3最低(p<0.05); L2和L3肝脏SOD活力较对照组有显著降低(p<0.05); L3丙二醛(MDA)活力较其他组别均有显著上升(p<0.05)。因此,在中华鳖饲料中适宜的脂肪对鱼粉和蛋白质有明显节约作用,蛋白质从46%降至41.3%,鱼粉比例由55%降至45%是可行的,适宜的脂肪比例为8.9%-12%。 2.饲料中利用脂肪节约鱼粉和蛋白质对中华鳖体组成和消化力的影响 脂肪含量14%的L3组体脂和肌肉脂肪含量显著高于CD(p<0.05); CD肌肉蛋白质含量显著高于其他组别(p<0.05); L3组氨基酸总和显著低于CD(p<0.05);对照组多不饱和脂肪酸总和显著高于其他组别(p<0.05)。各试验组淀粉酶、蛋白酶活力均无显著性差异(p>0.05);L3的脂蛋白酯酶(LPL)和肝酯酶(HL)较其他组别显著升高(p<0.05);可见,饲料的脂肪水平对中华鳖体组成和脂肪酶含量有显著影响。 3.中华鳖LPL和ACC部分基因序列的扩增 使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了中华鳖肝脏的蛋白酯酶(LPL)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的部分序列,取得GenBank序列号分别是JX010723和JX010724。 4.饲料中不同脂类对中华鳖肝脏LPL和ACC基因mRNA的表达的影响 5个试验组中华鳖肝脏LPL基因的mRNA表达量显著高于其他组别,脂肪含量14%的L3组最高(p<0.05);各试验组ACC基因的mRNA表达量无显著差异(p>0.05);因此,中华鳖饲料中高含量脂肪能诱导LPL的mRNA表达量增加。 5.植物蛋白部分替代鱼粉对中华鳖生长性能,体组成及消化力的影响 为了研究植物蛋白部分替代鱼粉对中华鳖稚鳖生长机能,体组成和消化力的影响。选取初重4.26±0.14g的稚甲360只,随机分成6组,每组3个平行,以6种等蛋白等脂肪饲料进行为期60天的养殖试验,其中,对照组(CD)鱼粉比例为52.5%,5种试验饲料鱼粉比例为45%,依次为混合植物蛋白替代组(MP),菜籽粕替代组(RS),棉籽粕替代组(CS),葵仁粕替代组(SF)和豆粕替代组(SB)。结果表明:MP和CD成活率相当(p>0.05),显著高于其他组别(p<0.05); MP、SB增重率略低于CD,显著高于RS(p<0.05);各试验组的肝脏指数(HSI)、特定生长率(SGR)均无显著差异(p>0.05); MP和CD全甲粗蛋白含量相当(p>0.05),高于其他组别,显著高于SF(p<0.05);必需氨基酸(EAA)总和MP, SF, SB与对照组无显著差异(p>0.05),显著高于RS(p<0.05);MP蛋白酶活力最高,显著高于CS,SF, SB(p<0.05); MP中华鳖中肠绒毛膜的密度和肠壁厚度显著优于其他组别。因此,中华鳖饲料中使用13.8%混合植物蛋白替代7.5%鱼粉是完全可行的。 6.植物蛋白部分替代鱼粉对中华鳖血清生化指标及非特异性免疫机能的影响 与对照组相比,血清中生化指标各试验组之间无显著性差异(p>0.05); SF和SB组中血清谷草转氨酶活力(AST)活力显著高于MP(p<0.05),表明肝脏有受损现象;MP呼吸爆发活力显著高于SF和SB(p<0.05);MP溶菌酶活力(LSZ)显著高于CS(p<0.05); MP的SOD活力与CD相当,显著高于SB(p<0.05)。表明:混合植物蛋白替代鱼粉有利于中华鳖的非特异性免疫机能的提高。