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目的:为进一步研究人类乙型肝炎病毒（HBV）提供接近自然感染状态的理想细胞模型。并在体外感染及转染HBV的模型中研究IFN-α对HBV复制的影响，探讨其抑制病毒复制的作用靶点，进一步了解IFN-α的作用机制。 方法:体外二步灌流法分离原代树鼩和人类肝细胞，纯化后的乙型肝炎病人血清感染上述肝细胞，用Southern blot和Northern blot检测感染后细胞内的HBVDNA和RNA，用ELISA方法检测细胞上清的HBsAg，用免疫组化检测细胞内HBsAg的表达。然后用不同剂量α干扰素(IFN-α)作用于感染HBV的原代肝细胞和转染鸭乙肝病毒(DHBV)的肝癌细胞系，用ELISA方法检测HBsAg的分泌表达水平，用Southern blot检测HBV DNA，用Northern blot方法检测MxA和HBV RNA。此外，我们用放线菌素D阻止DHBV转染细胞中的转录以进一步研究IFN-α的作用机理。 结果:时间动态分析表明在感染后的第4到12天，HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)、单链DNA(ssDNA)、RNA水平及HBsAg的量都有上升，其中cccDNA、ssDNA和RNA都是HBV的复制中间体，感染后12天，用免疫组化法可检测到树鼩肝细胞胞浆内的HBsAg抗原表达，阳性率约10％。为了检测IFN-α活性，我们分析了干扰素诱导的MxA蛋白的表达。实验结果表明在用IFN-α处理过的原代肝细胞中MxA的表达有显著的增高，表明IFN-α在我们的研究系统中是有活性的。我们还观察到IFN-α能够引起病毒RNA水平和分泌到细胞上清中HBsAg量的下降。而HBV RNA和HBsAg的下降不能用cccDNA的变化来解释，因为cccDNA的水平几乎没有受到IFN-α的影响。除此之外，我们发现在转染野生型DHBV的肝癌细胞中，IFN-α能够降低DHBV RNA水平。并且在线菌素D存在的条件下，IFN-α仍可显著减少DHBV RNA水平。 结论:原代肝细胞的HBV感染系统能够真实的反应HBV的生命周期，因此HBV可在原代树鼩肝细胞中稳定复制和表达。IFN-α在体外模型中可抑制嗜肝病毒复制。在HBV的感染模型中，IFN-α的作用靶点是HBVRNA。在DHBV的转染模型中，IFN-α的作用靶点是DHBV RNA。此外，IFN-α可诱导DHBV RNA的降解。总之，细胞培养模型是有用的实验工具，能评估药物对HBV复制和表达的抑制作用。本研究对IFN-α的抗病毒作用的深入探讨，能够进一步揭示嗜肝病毒科的分子生物学特性，并帮助开发新的抗病毒治疗策略，以控制乙肝病毒的感染。