广东地区猪流感血清学调查和病毒的分离鉴定

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinasee_liang
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猪流感(Swine influenza,SI)是由流感病毒引起的猪的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病。其特征为发病突然,高热,精神沉郁,食欲废绝,呼吸困难,阵发性咳嗽。SIV单独感染死亡率很低,但常常与其他呼吸道疾病继发或混合感染,使病情加重,死亡率增高,由此引起巨大的经济损失。此外,猪是禽流感病毒“禽-猪-人”传播链中重要的中间宿主,因此监测猪流感的流行规律将为人类流感的防控提供重要依据,具有重大的公共卫生学意义。  目前,随着猪流感感染人事件的不断发生,世界范围内猪流感的研究,已成为研究的热点。但是中国对猪流感的研究报道较少,本研究于2010年7月~2011年7月对对广东地区7个市区的规模化养猪场进行血清学调查,采集各种年龄阶段猪(种猪、保育猪、育肥猪)血清样品653份,用血凝抑制(HI)试验对血清进行检测,发现血清中存在H1、H3和H9亚型猪流感病毒抗体。HI试验检测H1亚型猪流感病毒抗体的阳性率最高为34.6%,H3亚型猪流感病毒抗体的阳性率为16.4%,H9亚型猪流感病毒抗体的阳性率为1.4%,种猪血清抗体的阳性率明显高于保育猪和育肥猪,SI具备在冬春季节多发的特点,在广东地区的猪群中未监测到H5亚型流感抗体的存在。  将广东地区7个市区猪场的280份样品(鼻棉拭子和病死猪肺脏),通过SPF鸡胚接种分离到5株猪流感病毒。通过血凝抑制(HI)试验及序列测定分析对这5株猪流感病毒进行了HA和NA亚型的鉴定,其中H1N1亚型猪流感病毒2株,H3N2亚型流感病毒3株。本论文对其中的3株H3N2亚型猪流感病毒进行了全基因测序和遗传演化分析,经过序列分析及进化树分析发现:A/swine/Guangdong/L1/11(H3N2)毒株的8个基因片段全部处于禽源流感病毒谱系内部,该病毒属于禽源猪流感病毒。A/swine/Guangdong/L2/10(H3N2)毒株的8个基因片段全部处于近代人源流感病毒谱系内部,与近代流行的人流感病毒的亲缘关系密切,该病毒属于典型的人源猪流感病毒。A/swine/Guangdong/L3/10(H3N2)毒株的HA,NA,NS,PA基因片段处于早期人流感病毒谱系内部;NP,PB1基因处于近代人流感病毒谱系内部;M,PB2基因处于猪流感病毒谱系内部,与禽源猪流感谱系亲缘关系较远,该病毒为“人-猪”二源基因重组猪流感病毒。这3株流感病毒除HA基因外,其它所有的基因均发生了不同程度的基因重组,各基因片段与不同亚型、不同地区、不同宿主分离的不同毒株之间发生了基因重排,充分证明猪具有流感病毒“混合器”的作用。
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