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蔬菜是关系人类健康状况的重要食物之一,蔬菜病害的生物防治是提高蔬菜产量和品质的有效途径。本研究采用室内平板对峙培养和盆栽试验相结合的方法,研究多粘类芽孢杆菌 BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2对黄瓜和番茄枯萎病的防治效果;应用硫酸铵分级沉淀和有机溶剂固体浸提等方法分别对两株生防菌的抗菌物质进行分离提取;采用PCR-DGGE分子生物学方法,研究不同采样时期两株生防菌对两种蔬菜根际微生物群落结构的影响。
试验结果表明,两株生防细菌不同稀释倍数的代谢产物对3种蔬菜病害病原真菌分生孢子萌发和4种病原菌菌丝生长均具有抑制作用。当两菌株代谢产物稀释5倍时,对分生孢子萌发的抑制率达到80%以上;两菌株代谢产物在稀释2倍和5倍时,对4种病原真菌菌丝生长的抑制率在40%~80%之间,与对照相比差异极显著(P<0.01)。盆栽试验表明,BRF-1和BRF-2生防细菌菌悬液及其无菌代谢产物对黄瓜和番茄枯萎病不仅具有较好的防治效果,而且具有明显的促进生长作用。
通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-50柱层析并采用抑菌活性和SDS-PAGE跟踪检测,从多粘类芽孢杆菌BRF-1菌株代谢产物中分离纯化到一种对大豆立枯丝核菌具有拮抗活性的抗菌蛋白,分子量约35.4 kDa。用乙醇、甲醇有机溶剂和水对BRF-2代谢产物进行固体浸提,抑菌圈半径分别为17.0 mm,13.5 mm,9.5 mm,其中乙醇提取的活性物质通过气相色谱质谱联用仪进行初步鉴定,结果表明拮抗活性物质的主要成分为含有羧基的酯类物质。
采用PCR—DGGE技术,研究接种生防菌BFR-1和BRF-2对黄瓜和番茄不同时期根际土壤微生物群落结构的影响。结果表明,两株生防菌对两种蔬菜根际细菌群落结构影响不明显,作物种类和取样时期是决定根际细菌群落结构变化的主导因素,生防菌的作用处于次要地位。而对两种蔬菜根际真菌群落结构的研究表明,番茄根际真菌群落结构受生防菌处理的影响较采样时期的影响大,黄瓜根际真菌群落结构受处理和时期影响都不明显。因此,真菌群落结构受生防菌影响的大小因作物种类而异。