海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究

被引量 : 11次 | 上传用户:jieswh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
癌症是当前严重危害人类健康、威胁人类生命的主要常见病之一,并且逐渐全球化。天然生物来源的抗肿瘤活性药物具有广谱、高效、毒副作用小的特点,在抗癌药物的研发中占有非常重要的地位,其中,多糖类物质因生物活性广泛,而成为了医学领域国内外专家学者普遍关注的焦点之一。海洋是生命的起源地,高盐、高压、低温、光照不足的特殊环境使海洋生物体内的多糖与陆生生物相比具有很大的差别,因此,海洋抗肿瘤活性多糖的研究尤其引人瞩目。扇贝是重要的海洋生物资源之一,营养价值高且含有多种生物活性成分,在海洋抗癌药物研究中具有很好的应用和开发前景。本研究以海湾扇贝为原料,进行扇贝多糖的提取和纯化,并对其抗肿瘤活性进行研究,为扇贝多糖的进一步研究及应用奠定基础。主要研究结果如下:(1)海湾扇贝粗多糖的提取工艺研究:采用热水、二次浸提法提取海湾扇贝粗多糖,通过单因素试验和响应曲面法试验设计对海湾扇贝粗多糖提取工艺进行优化,确定了最佳提取工艺条件为浸提温度90℃、液固比50.0mL/g、浸提时间180min,在此条件下海湾扇贝粗多糖的平均提取率约为57.7mg/g。(2)海湾扇贝粗多糖纯化和分离技术研究:对海湾扇贝多糖的蛋白质脱除方法进行比较,结果表明75%乙醇沉淀结合TCA法处理能较好地去除多糖中的蛋白质,脱除率可以达到91.80%。DEAE-52纤维素离子交换层析分离结果表明海湾扇贝多糖由中性多糖和酸性多糖两部分组成,其中,酸性多糖为其主要成分,但酸性多糖的具体组成和结构还需要进一步研究。(3)海湾扇贝多糖体外抗肿瘤效果及机制研究:采用MTT比色法检测海湾扇贝多糖对体外培养的不同肿瘤细胞的增殖抑制作用,利用光学显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜及流式细胞仪观察、分析其对不同肿瘤细胞的细胞形态、显微结构、超微结构及细胞周期的影响。结果表明,海湾扇贝多糖对体外培养的肿瘤细胞具有直接的细胞毒性作用,能够抑制体外培养的小鼠黑色素瘤细胞株B16F10、人卵巢上皮癌细胞株SKOV3和人肝癌细胞株HepG2的生长;经20.0mg/mL海湾扇贝多糖处理后,三种肿瘤细胞的细胞形态、显微结构和超微结构均发生了改变,表现为细胞皱缩、透明度降低、细胞密度降低、膜结构改变、核结构改变、核内染色质固缩等,并可对细胞周期产生不同程度的阻抑作用,说明海湾扇贝多糖可通过对肿瘤细胞的直接作用而发挥抗肿瘤的效果。(4)海湾扇贝多糖体内抗肿瘤效果研究:通过建立小鼠肝癌细胞株H22腹水瘤荷瘤小鼠模型,以灌胃方式给予不同剂量的海湾扇贝多糖,进行海湾扇贝多糖体内抗肿瘤效果研究。结果表明每日灌胃150.0mg/kg、250.0mg/kg的海湾扇贝多糖能够抑制小鼠肝癌细胞株H22腹水瘤的形成,两种剂量条件下试验小鼠的生存期分别延长38.68%和32.92%,说明海湾扇贝多糖在适当剂量条件下具有体内抑制肿瘤细胞生长的作用。(5)海湾扇贝多糖免疫增强活性研究:结果表明,在试验剂量范围内,海湾扇贝多糖对试验小鼠的肝脏指数均无显著影响,但能明显提高脾脏指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬率以及脾脏T-淋巴细胞转化能力,其中每日灌胃100.0mg/kg、150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小鼠的脾脏指数最高,分别为(3.8±0.4)mg/g和(3.7±0.5)mg/g,两者之间没有显著差异;每日灌胃150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小鼠的胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均最高,分别为(3.4±0.5)mg/g、(49.70±1.09)%、0.90±0.20;每日灌胃100.0mg/kg、150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小脾脏T-淋巴细胞增殖能力显著高于其他剂量组,刺激指数分别为1.25±0.10和1.22±0.15,且两组之间差异不显著。海湾扇贝多糖的免疫增强活性可间接起到抑制肿瘤细胞生长的作用,并具有较高的安全性。(6)海湾扇贝多糖抗氧化活性研究:体外试验结果表明,海湾扇贝多糖有较强的体外抗氧化活性,能够清除试验体系中的·OH、DPPH·和O2-·,并具有较强的还原能力;体内试验结果表明,海湾扇贝多糖能够显著提高试验小鼠肝、肾组织中的SOD、GSH-Px、CAT活力,降低MDA含量,提高机体的抗氧化能力。其中SOD活性以150.0mg/kg剂量组为最高,分别为(24.96±0.79)U/g·mass和(1.79±0.03)U/g·mass;GSH-Px活力以100.0mg/kg剂量组为最高,分别为(637.22±27.04) U/g· mass和(255.72±21.59)U/g·mass;CAT活力以150.0mg/kg剂量组为最高,分别为(6473.08±55.68)U/g·mass和(5269.41±47.02)U/g·mass;200.0mg/kg剂量组MDA含量最低,分别为(20.47±1.31)nmol/g·mass和(13.13±0.23)nmol/g·mass。海湾扇贝多糖对自由基的清除能力,可以提高机体的抗氧化水平,避免DNA被过量的活性氧氧化损伤而导致细胞的癌变,防止肿瘤的发生。
其他文献
近年来,由于人类经济活动生产污染不断增加,世界上许多地区土壤污染面积不断扩大,影响了土壤的生态结构性和功能稳定性。目前,许多工厂从城市中心搬出,留下的工厂占地大部分受到污
近几十年来,我国的经济得到了飞速发展,我国的城市化已成为必然趋势,城市化用地相对紧张。显然基坑工程受到周围环境的制约进一步升级,而且环境对基坑变形控制的要求也更加的严格
目的:探讨呼吸内科住院患者痰标本留取影响因素及对策。方法:采用问卷方式调查我院呼吸内科180例住院患者的痰标本留取情况。结果:造成痰标本未能正确留取的因素主要包括患者
四川省水电投资经营集团有限公司(后文中如不特别注明,“集团”皆指的是四川省水电投资经营集团有限公司)是经省政府授权,负责投资、经营、管理四川省地方电力省级国有资产的
食品安全是人们生活中关注的最为关心的问题。当人类进入工业新时代,随着食品养殖生产加工等技术的不断改进和完善,食品的数量种类也飞速增长,极大地丰富了人们的基本生活需求,也
<正>"混凝土与水泥制品虽然是一个非常传统的产业,但它并不是一个简单的产业,我非常欣赏一句话,‘我们不应把水泥制品当做一个混凝土块,而应将其当做一个艺术品来做’"。说出
目的:调查高血压患者自我管理行为现状,结合“健康生态学”模型,研究各种影响因素与高血压患者自我管理水平的关系。方法:2013年9月至2014年5月抽取邹平县两家二甲综合医院297
团购,可以说是随着互联网而发展起来的一种新兴的商业模式,由于竞争关系,团购中消费后悔事件不断出现,本文拟通过研究后悔的形成机制,提出团购管理建议,以期提高团购网站的经
稀土发光材料广泛应用于照明、显示、显像、医学放射学图像、辐射场的探测和记录等领域。YAG:Ce3+荧光粉具高效、节能、寿命长等特点,是被广泛研究与应用的黄光系荧光材料。
自二十世纪八十年代邓小平总书记提出改革开放以来,我国的经济开发区在国家政策指导下得到飞速发展。据相关数据统计,在仅占国土面积万分之一的土地上,五十四个国家经济开发区产