【摘 要】
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小鹅瘟(Gosling plague, GP)是由细小病毒科、依赖病毒属中的鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV)引起的一种烈性传染病,主要侵害4日龄至20日龄内的雏鹅和雏番鸭,引起急性肠炎
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小鹅瘟(Gosling plague, GP)是由细小病毒科、依赖病毒属中的鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV)引起的一种烈性传染病,主要侵害4日龄至20日龄内的雏鹅和雏番鸭,引起急性肠炎及肝、肾、心等实质脏器败血性病变,尤其以小肠部位的纤维性、栓塞性病变为主要特征,发病率和死亡率可高达90%以上。目前,此病每年都有不同程度的流行,是养鹅及番鸭地区最主要的传染病之一,造成了严重的经济损失。由于本病长期困扰着养鹅业的发展,所以需要一种准确、简便的快速诊断方法来对该病作出早期诊断。胶体金免疫层析(GICA)技术正是一种简易、快速的免疫学检测技术,自从20世纪90年代初由Beggs等用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定以来,在很多领域都有应用,如激素或疾病有关蛋白的检测;病原微生物有关蛋白或抗原抗体的检测;寄生虫相关抗原、抗体的检测;血、尿药物浓度的监测。但目前仍没有应用此技术检测鹅细小病毒抗体的报道,而由于此技术的特性,将其应用于鹅细小病毒抗体的快速检测,将对养鹅业的健康发展产生重要影响。GPV-VP3蛋白是病毒的主要衣壳蛋白,约占衣壳蛋白总含量的80%,暴露于病毒粒子表面的氨基酸序列均出现在VP3蛋白多肽链内,且VP3内含有GPV主要抗原决定簇成分,是GPV主要免疫保护性抗原,能特异性结合自然感染鹅血清中的抗体,因此,其能够作为金标记抗原,捕获抗体。本研究用柠檬酸钠-氯金酸氧化还原法制备18nm胶体金颗粒,标记鹅细小病毒(GPV) VP3重组蛋白制作金标垫,检测线的捕获抗体为兔抗鹅IgY多克隆抗体,质控线的捕获抗体为兔抗VP3多克隆抗体,组装胶体金免疫层析试纸条,检测鹅细小病毒抗体,并利用Point-of-care testing (POCT) scanner进行定量研究,最低检出量为9.89ng/mL。制得的试纸条与琼脂扩散试验(AGP)、酶联免疫吸附试验(ELISA)相比,符合率分别为100%、97.7%。由于本研究的试纸条特异性强、敏感性高、简便快速、重复性好,所以其可用于快速诊断鹅细小病毒抗体,监测鹅体内的抗体水平及其变化规律,便于适时进行免疫防护,减小了该病对养鹅业的危害,有利于养鹅业健康、稳定的发展。
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