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目的：分子生物学技术的迅速发展使人们对胃癌生物学行为的研究进入分子水平，认为胃癌的发生、发展与多种基因改变有关。p53基因是目前在胃癌组织中最常发生异常的抑癌基因，它的失活在胃癌的发生、发展中发挥着重要作用。肿瘤细胞的增殖活性与肿瘤的浸润、转移和预后密切相关，而PCNA(增殖细胞核抗原)代表着肿瘤细胞的增殖状态。本实验通过检测p53蛋白、PCNA在胃癌组织中的表达情况，从分子水平探讨p53蛋白、PCNA与胃癌生物学行为及预后的关系，寻找有助于胃癌预后判断的客观指标。
方法：91例胃癌组织均取自泸州医学院1997～1998年手术切除标本(男70例，女21例，年龄31～71岁)，经10％福尔马林固定，石蜡包埋存档，4μm厚连续切片，HE染色。临床病历资料来源于附院信息科，临床随访资料以信访、电话或门诊随访方式获得。p53蛋白和PCNA的检测采用SABC法免疫组化染色：石蜡切片常规脱腊至水，用0.3％H2O2(甲醇配制)室温下浸泡10分钟以阻断内源性过氧化物酶活性，微波修复抗原5分钟，冷却至室温，正常血清封闭非特异性背景染色30分钟，滴加第一抗体(鼠抗p53mAb、鼠抗PCNAmAb)，湿盒内孵育1～2小时，PBS液洗涤2分钟×3次，切片加生物素结合的山羊抗鼠IgG，湿盒内孵育30分钟，PBS液洗2分钟×3次，加SABC试剂，湿盒内孵育30分钟，PBS液洗涤2分钟×3次。DAB显色，重染核、脱水、透明、封片、观察。
结果：(1)91例胃癌组织中p53蛋白阳性率为62.6％，PCNA强阳性率为65.9％，二者与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位无关(P＞0.05)。(2)p53蛋白表达与肿瘤的大小无关(P＞0.05)，与浸润深度相关(P＜0.01)。肿瘤浸润至浆膜及浆膜以外者p53蛋白阳性表达率明显高于浆膜未受侵者。(3)PCNA表达与胃癌的大小、浸润深度呈正相关(P＜0.05，P＜0.01)。随着肿瘤直径的增大，浸润深度的加深，PCNA强阳性表达率明显增高。(4)p53蛋白、PCNA的表达与胃癌的淋巴结转移状况呈正相关(P＜0.05)，淋巴结发生转移的胃癌p53蛋白阳性表达率、PCNA强阳性表达率明显增高。(5)p53蛋白、PCNA的表达与胃癌的分化程度、组织类型显著相关(P＜0.05)。胃癌的分化程度越低，二者的异常表达率越高。(6)p53蛋白阳性的胃癌患者术后2年生存率明显低于p53蛋白阴性者(P＜0.01)，但二者的3年、5年生存率无显著性差异(P＞0.05)。PCNA强阳性表达的胃癌患者术后2年、3年、5年生存率均明显低于PCNA弱阳性表达者(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05)。
结论：(1)p53蛋白阳性、PCNA强阳性表达与胃癌患者的年龄、性别和肿瘤部位无关，而与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、分化程度、组织学类型等生物学行为密切相关。随着肿瘤浸润深度的加深，分化程度的降低和淋巴结转移范围的增大，胃癌组织中p53蛋白阳性、PCNA强阳性表达明显增多。提示p53蛋白阳性、PCNA强阳性表达的胃癌患者预后不良。(2)p53蛋白阳性和PCNA强阳性表达的胃癌患者术后生存时间较p53蛋白阴性及PCNA弱阳性表达者短，因此可用p53蛋白和PCNA作为胃癌预后判断的客观指标，而PCNA比p53蛋白更敏感。