论文部分内容阅读
系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一种典型的自身免疫性疾病，其主要特征是机体产生广泛的自身抗体，靶向作用于一些正常的细胞组分，从而导致不可逆的组织损伤。狼疮患者的临床表现差异很大，从轻度的皮肤异常病变到严重的、危及生命的内部器官受损均见报道。研究发现诸多因素可导致狼疮的易感性，包括遗传变异、表观遗传调控、环境因素、免疫功能缺陷和激素等。微小RNA(MicroRNA，miRNA)是一种短的、非编码RNA，在转录后水平上调控基因的表达。日渐增多的研究发现，异常表达的miRNA参与多种自身免疫病的发病进程。此外，近年来一些研究使用B细胞靶向治疗狼疮取得显著成功，这提示B细胞在狼疮发病中起到重要作用。因此，本课题旨在深入研究microRNA-155(miR-155)及B细胞在狼疮中的作用。一方面研究了miR-155在pristane诱导的狼疮弥漫性肺泡出血(Diffuse Alveolar Hemorrhage，DAH)以及慢性移植物抗宿主疾病(Chronic GraftVersus Host Disease，cGVHD)诱导的狼疮中的作用;另一方面也探索B细胞的抗体依赖性和抗体非依赖性功能对狼疮发病进程的潜在贡献。 本课题取得的主要研究成果和发现如下:1）miR-155的表达在pristane诱导的DAH中显著增高，敲除或下调miR-155的表达降低了DAH的发生率。miR-155通过靶向作用于多个NF-κB通路的负调控分子，促进了炎症反应。另外，研究中首次发现抑炎因子PPAR-α是miR-155的一个直接靶点;2）miR-155在cGVHD诱导的狼疮中异常高表达。miR-155敲除小鼠在经腹腔注射Bm12小鼠的CD4 T细胞后仍出现狼疮相关表型，包括:脾肿大，T细胞、B细胞的异常活化，及血清中抗染色质IgG水平升高。而在供体T细胞中敲除miR-155能够有效地逆转这些狼疮表型;3）CD11c+B细胞在cGVHD诱导的狼疮发病小鼠体内显著增多。体外TLR7刺激发现，CD11c+B细胞产生大量抗染色质抗体。基因敲除T-bet显著减少了小鼠脾脏中CD11c+B细胞的比例和数量，降低了血清中抗染色质IgG2a水平;4）B细胞应答于Toll样受体(Toll-LikeReceptor，TLR)配体，产生多种细胞因子。在不同的B细胞亚群中，边缘区B细胞(marginalzone B cell，MZB)应答于TLR7的配体—R848并产生大量白细胞介素6(Interleukin6，IL-6)。而IFNα与R848共刺激显著地增加了MZB细胞应答于R848产生的IL-6。此外，在R848刺激下滤泡B细胞(Follicular B cell)和过渡2型B细胞(Transitional2 B cell，T2B)仅表达少量IL-6，然而在IFNα和R848的联合刺激下，这两种细胞分泌的IL-6水平显著升高。 以上的研究加深了对miR-155在狼疮靶组织损伤及其对T细胞的作用的认识。同时也揭示了B细胞的抗体依赖性和抗体非依赖功能在狼疮中的潜在作用。这些发现为开发潜在的、新的狼疮治疗手段提供了理论基础。